RNAi的原理和应用.doc

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1、RNAi的原理和应用摘要：RNA干扰(RNAinterference,RNAi)现象是一种进化上保守的抵御转基因或外来病毒侵犯的防御机制。在内切核酸酶(一种具有RNaseⅢ样活性的核酸酶，称为Dicer.)作用下加工裂解形成21～25nt（核苷酸）的由正义和反义序列组成的干扰性小dsRNA,即siRNA。果蝇中RNaseIII样核酸酶Dicer含有解旋酶(helicase)活性以及dsRNA结合域和PAZ结构域.已发现在哺乳动物中也存在Dicer同类物。siRNA与特定的酶结合形成RNA诱导的沉默复合物RISC。关键词：RNA干扰siRNAmiRNA抑制机制Prin

2、ciple andapplicationofRNAiWangChunrongSichuanNormalUniversity.Abstract: RNAinterference (RNA interference, RNAi) isa defensemechanismof evolutionaryconserved against transgenic or alienvirus invasion. The endonuclease (one withRNaseⅢ likeactivityof nuclease, referredtoasDicer.) process

3、ingfracture formedundertheactionof 21 ~25NT (nucleotide) composedof senseandantisense sequencesof smallinterfering dsRNA, namelysiRNA. RNase III likenucleicacid enzyme DicerinDrosophilacontains helicase (helicase) activityanddsRNA bindingdomainandPAZdomain. Havebeenfoundin mammals ther

4、eare Diceranalogues. SiRNA and specificenzyme combinedwiththeformationof RNAinducedsilencingcomplex RISC.Keywords: siRNA miRNA RNA interferencesuppressionmechanism目录第一章对RNA干扰的基本认识………………………………………………………11.1RNA干扰提要………………………………………………………11.2RNA干扰的发现…………………………………………………………………………….1第二章作用机制…………

5、……………………………………………………………………22.1RNA干扰的作用机制…………………………………….........................22.2RNA干扰的分子抑制机制…………………………………………………32.2.1转录抑制…………………………………………………………………………………..32.2.2转录后抑制……………………………………………………………………….………32.2.3翻译抑制…………………………………………………………………………………..3第三章RNA干扰的作用…………………………………………………………….4第四章RNA干

6、扰的应用…………………………………………………………….4参考文献…………………………………………………………………………………….6致谢………………………………………………………………..…………………………6前言：RNA干扰（RNA interference，缩写为RNAi）是指一种分子生物学上由双链RNA诱发的基因沉默现象，其机制是通过阻碍特定基因的翻译或转录来抑制基因表达。当细胞中导入与内源性mRNA编码区同源的双链RNA时，该mRNA发生降解而导致基因表达沉默[1] 。与其它基因沉默现象不同的是，在植物和线虫中，RNAi具有传递性，可在细胞之间传播，此现象

7、被称作系统性RNA干扰(systemicRNAi)[2][3]。在秀丽隐杆线虫上实验时还可使子一代产生基因突变，甚到于可用喂食细菌给线虫的方式让线虫得以产生RNA干扰现象。RNAi现象在生物中普遍存在。正文：第一章对RNA干扰的基本认识1.1RNA干扰提要RNA干扰(RNAinterference,RNAi)现象是一种进化上保守的抵御转基因或外来病毒侵犯的防御机制。将与靶基因的转录产物mRNA存在同源互补序列的双链RNA(doublestrandRNA,dsRNA)导入细胞后,能特异性地降解该mRNA,从而产生相应的功能表型缺失,这一过程属于转录后基因沉默机制(