马溪平----环境工程微生物实验讲义.doc

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1、环境工程微生物实验讲义适用专业：环境科学、环境工程主讲教师：马溪平辽宁大学教务处制二零一四年九月课程简介环境工程微生物学作为一门边缘学科，是运用环境工程的手段和方法来加速和强化自然界中污染物的循环、转化和降解，以充分发挥微生物降解、转化污染物的巨大潜力，实现环境工程的高效、稳定和资源的再生利用，消除人类活动对环境所造成污染的一门学科。它在改善人类的生存环境和消除环境污染中起到重要的作用。该课程要求学生要将理论与工程实践紧密结合，是一门实践性很强的课程。因此，大量的课程实验成为巩固和加深学生对基本知识和基本技能掌握与理解

2、的必然要求。环境工程微生物学实验是环境工程、环境科学、环境监测等专业本科生的专业基础实验课。掌握必要的环境工程微生物学实验技能对于理解和认识环境工程微生物学的相关理论，从事环境工程的研究工作具有重要的意义。目录实验一水中溶解氧的测定1实验二水中化学耗氧量COD的测定6实验三生化需氧量BOD的测定15实验四水中氨态氮的测定21实验五水中总氮的测定26实验六微生物脱酚测定31实验七微生物脱氰测定39实验八活性污泥性质的测定48实验九污水中菌胶团和游离细菌的观察52实验十污水中微型动物的观察和计数55实验十一污水中鞘细菌的培

3、养分离和纯化59实验十二球衣细菌鞭毛染色和主要生理生化实验测定63实验十三水质的细菌学检验68附录77实验一水中溶解氧的测定一、实验目的及原理溶于水中的氧称为溶解氧(DO)。学习和掌握用碘量法测定DO的原理和方法。向水样中加入硫酸锰溶液和碱性碘化钾溶液，它们生成的氢氧化锰Mn(OH)2沉淀，迅速与水中溶解氧化合成锰酸MnO(OH)2，过量的氢氧化锰与锰酸作用生成锰酸锰MnMnO3。加入浓硫酸酸化，使已经化合的溶解氧（以锰酸锰形式存在）与溶液中的碘化钾起氧化作用后释放出碘，溶解氧越多，释放出碘也越多。最后用淀粉作指示剂，

4、以硫代硫酸钠标准溶液滴定，可计算出水样中溶解氧的含量。反应式如下：4MnSO4+8NaOH→4Mn(OH)2↓+4Na2SO4（白色）2Mn(OH)2+O2→2MnO(OH)2或2H2MnO3锰酸（棕色）2H2MnO3↓+2Mn(OH)2→2MnMnO3↓+4H2O（棕色）2MnMnO3+6H2SO4+4Kl→2MnSO4+2I2+6H2O+2K2SO4I2+2Na2S2O3→2NaI+Na2S4O6如水中有Fe3+、Fe2+、NO2、O2－、SO42－有机物严重污染对本法均有干扰。二、实验用品及设备1．试剂①硫酸锰溶

5、液称取分析纯硫酸锰（MnSO44H2O）48克溶于蒸馏水中，过滤不溶物，稀释至100亳升。②碱性碘化钾溶液：称取分析纯或化学纯氢氧化钠100克，溶于60—80亳升蒸馏水中，称取分析纯碘化钾30克，溶于40毫升蒸馏水中，待氢氧化钠溶液冷却后，将两溶液混合，并稀释至200毫升。此溶液贮于棕色瓶中。③重铬酸钾标准溶液C（1/6K2Cr2O7）0.0250mol/L称取于105～110℃烘干2h并冷却的优级纯重铬酸钾1.2258g，溶于水，移入1000ml容量瓶中，用水稀释至标线，摇匀。④硫代硫酸钠溶液称取分析纯硫代硫酸钠（N

6、a2S2O35H2O）3.2克，溶于煮沸并放冷的蒸馏水中，加入0.2克无水碳酸钠，并稀释至1000ml。贮于棕色瓶中，使用前用0.0250mol/L重铬酸钾标准溶液标定，标定方法如下：于250ml碘量瓶中，加入100ml水和1g碘化钾，加入10.00ml0.0250mol/L重铬酸钾标准溶液、5ml（1＋5）硫酸溶液、密塞，摇匀。于暗入静置5min后，用硫代硫酸钠溶液滴定至溶液呈淡黄色，加入1ml淀粉溶液，继续滴定至蓝色刚好褪去为止，记录用量。⑤（1＋5）硫酸取分析纯，比重为1.84浓硫酸50毫升，徐徐加入250毫升蒸

7、馏水中。⑥1%淀粉指示剂称取1克可溶性淀粉，用少量蒸馏水在小烧杯中调成糊状，然后加入100毫升煮沸的蒸馏水，冷却后再加入0.125克水杨酸，以防止变质。2．仪器①250毫升溶解氧瓶（也可用250毫升无色小口试剂瓶代替）。②250毫升碘量瓶。③50毫升滴定管。④移液管。⑤250毫升三角瓶。一、实验内容及步骤1．用虹吸法取水样。使水样充满溶解氧瓶，盖紧玻璃瓶，如瓶壁有小气泡，应仔细敲击使气泡逸出。2．取下瓶塞，用移液管插入瓶内液面以下，加入1毫升硫酸锰溶液。3．再按同法加入3毫升碱性碘化钾溶液，盖紧瓶塞，此时亦应注意不使瓶

8、中留有气泡。4．将样瓶颠倒摇动数次，使加入的试剂与水样混合均匀。5．静置数分钟后，至沉淀降至瓶中部，再颠倒摇动一次，使溶解氧得以固定。6．待沉淀重新下降至瓶底时，用移液管沿瓶口插入液面下加入3毫升浓硫酸，盖紧瓶塞颠倒混合，使沉淀全部溶解，再于暗处静置5分钟。7．用移液管取出100毫升静置后的溶液，放在250毫升的三角瓶中，用硫代硫