免疫层析试验.doc

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1、免疫层析试验以双抗体夹心法测尿hCG为例来介绍免疫层析试验的方法。[目的](1)掌握免疫层析试验的原理。(2)熟悉双抗体夹心法测尿hCG的方法、结果判定及应用。[原理]抗hCG免疫金复合物干片粘贴在试剂条近下端G区(图1-17)，抗hCG单克隆抗体和小鼠IgG抗体分别固化于NC膜的测试区(T区)和质控参照区(C区)。当试纸条下端(A区)浸入液体标本中，吸水材料即吸取液体，通过层析作用，液体向B端移动，流经干片时，使抗hCG免疫金复合物复溶，并带动其向膜条渗移。若标本中有hCG，可与抗hCG免疫金复合物结合。此抗原体

2、复合物流至T区时即被固相抗hCG单克隆抗体所获，形成金标抗体一抗原一抗体复合物，在T区显现出红色反应线条。过剩的免疫金复合物继续前行，至C区被固相抗小鼠IgG捕获，呈现出红色质控线条。[材料](1)“一步金”法早早孕妊娠诊断试纸条(有商品供应)。(2)孕妇尿液，待测尿液。(3)尿液收集杯等。[方法](1)将试剂条及待测标本置室温一定时间以充分复温。(2)从原包装铝箔袋中取出试剂条，将试剂条按箭头方向插人尿液标本中。注意:尿液液面不能超过试剂条的标记线。(3)约5S后取出放于干净平整的台面上观察，3min时读取结果，

3、10min后判定无效。在戏迟出死~条心线待技床样无h(G(阴临)[结果判断]1.阴性试剂条上仅质控区出现条紫红色线，在测试区内无紫红色线出现(图1-18a)。2.阳性试剂条上出现两条紫红色线，一条位于测试区内，另一条位于质控区内(图1-18b)。3.弱阳性试剂条测试区的线条颜色明显浅于质控区内的紫红色线，表明可疑，2d后应重新测试，以免漏诊(图1-18c)。4.无效试剂条上无任何线条出现，或仅出现测试区线条而质控区未出现，表明操作过程不正确或试剂条已变质失效。