DB32∕T 3115-2016 菊花脱毒种苗生产技术规程.pdf

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1、ICS65.020.20B05备案号：51460-2016DB32江苏省地方标准DB32/T3115-2016菊花脱毒种苗生产技术规程Technologyofvirus-freechrysanthemumstockproduce2016-09-20发布2016-11-20实施江苏省质量技术监督局发布DB32/T3115-2016目次前言................................................................................II1范

2、围...............................................................................12规范性引用文件.....................................................................13待脱毒材料.........................................................................14脱毒处理.........

3、..................................................................15病毒检测...........................................................................26脱毒原种苗的保存、扩繁与炼苗移栽...................................................27脱毒原种苗的生物性状观察.......................

4、....................................38脱毒原种苗的繁殖...................................................................39建立脱毒苗母本圃...................................................................310脱毒种苗的质量检测...................................................

5、.............311包装与贮运........................................................................3附录A（规范性附录）RNA病毒的反转录——聚合酶链式反应（RT-PCR）检测法...........5IDB32/T3115-2016前言本标准按GB/T1.1-2009《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写》组织编制。本标准由南京农业大学提出并归口。本标准起草单位：南京农业大学。本标准主要起草人：陈素梅、管志勇

6、、吴丹、张飞、房伟民、蒋甲福、陈发棣。IIDB32/T3115-2016菊花脱毒种苗生产技术规程1范围本标准规定了菊花脱毒种苗生产技术要求和规程.本标准适用于常见菊花脱毒种苗的生产。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本标准。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本标准。NY/T1591-2008菊花切花种苗等级规格DB32/T1530-2009切花菊种苗生产技术规程3待脱毒材料凡有待进行脱毒处理的品种均应

7、是通过合法途径引进的，签署有关品种权保护协议，或者经自主选育的、具有知识产权的品种。4脱毒处理4.1茎尖培养脱毒4.1.1无菌苗再生体系的建立经检测含有特定病毒的菊花，取其越冬脚芽，进行外植体表面灭菌，具体步骤如下：剪除茎段上的叶片，用流动的蒸馏水冲洗15分钟后，用滤纸吸干后，于超净工作台上用75%酒精浸泡30s，再转移到0.1%升汞中洗涤3～5min，取出，用无菌水冲洗5～6次，每次不少于3min，经消毒灭菌后的菊花茎段剪成小段，每段长2-3cm，带有1～2腋芽，接种于MS培养基中，每个组培瓶1～2

8、个茎段。4.1.2剥取茎尖在超净工作台上操作，于解剖镜下，将材料置于消毒的滤纸上，用经消毒的手术刀和解剖针逐步剥去外层叶片，切取0.5～1.0mm直径大小的带有1～2片叶原基的茎尖顶端组织。4.1.3分化培养将剥取的茎尖接种于经过高温湿热灭菌的分化培养基上，并对接种的茎尖分别编号，置于25℃、光照强度1500～3000lx、光照时间16h/天的条件下培养，2～3个月后可分化出新芽。1DB32/T3115-20164.1.4诱导生根切取1～2cm分化出的新