空气细菌培养操作规程.doc

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1、空气细菌培养操作规程1.基本原理：空气中的细菌等微生物尘粒一起下降，在室内可采样处放好营养琼脂平板，采样高度距离地面0.8~1.5m，采样时将平板打开，暴露5min或10min盖好平板。将平板置于37℃恒温箱培养48h，计算菌落数。2.所需设备：9cm普通琼脂平皿，37℃恒温培养箱，记号笔，手套，口罩。3.采样及采样原则：采样后必须对样品进行相应指标的检测;送检时间不的超过6h,样品保存在0~4℃条件时不得超过24h。4.采样时间：选择消毒处理后与医疗活动之前期间采样。5.采样高度：与地面垂直高度0.8~1.5m。6.布点方法：室内面积<30㎡,对角线内、中、外处设

2、三点，内外点布位距墙壁1m处。如下图：室内面积>30㎡，设四角及中央五点，四角的布点位置应距墙壁1m处。如下图：1.采样方法：（1）打开平皿，将盖口向下扣放，计时。（2）暴露5min。（3）记录采样房面积、时间、地点、位置、采样人及采样时环境条件（温度、湿度）。（4）看表5min，收取平皿。入室内面积<30㎡，一条对角线上取三点，放平皿时先放最里边，收取时先收最外边点上的平皿。在平皿上注明采自的科室房间，用胶布把平皿及平皿盖子固定好，以免在送检途中平皿及平皿盖子分离造成污染。2.注意事项：（1）平皿盖子要反扣于培养皿边上，禁止内面向上放于桌面。（2）培养期间禁止人员

3、走动。3.细菌数的计算方法细菌总数（cfu/m3=4500N/A×T）式中A=平板面积（cm2）T——平板暴露时间（min）N——平均菌落数（cfu）　　这个计算公式是根据在面积100cm3的培养基表面，5min内能落下的细菌相当于10L中含的细菌数而推算出来的。4.空气消毒效果和污染状况的评价空气消毒效果的比较应在消毒前后取样进行培养，如消毒后空气中细菌数明显下降，说明消毒效果好，下面规定适用GB15982——1995规定：Ⅰ类区域细菌总数≤10cfu/m3，并且未检出致病菌为消毒合格。Ⅰ类环境包括层流洁净手术室和层流洁净病房只能采用层流通风才能空气中的微生物减到

4、此标准以下。Ⅱ类区域细菌总数≤200cfu/m3并且未检出致病菌为消毒合格。Ⅱ类环境包括普通手术室、产房、婴儿室、早产儿室、普通保护性隔离室、供应室洁净区、烧伤病房、重症监护病房、采用循环风紫外线空气消毒器或静电吸附式空气消毒器，这类均为有人房间，必须采用对人无毒无害且可连续消毒才能使空气中的微生物减到此标准以下。Ⅲ类区域细菌总数≤500cfu/m3并且未检出致病菌为消毒合格。Ⅲ类环境包括儿科病房、妇产科检查室、注射室、换药室、治疗室、供应室清洁区、急诊室、化验室、各类普通病房室和房间，采用紫外线消毒，化学消毒剂熏蒸或喷雾消毒。　　11.一般空气培养报告单格式楼层区

5、域结果单位（cfu/m3）提示细菌总数正常范围（cfu/m3）说明一楼Ⅱ类≤200cfu/m3Ⅱ类环境区域包括普通手术室、产房、婴儿室、早产儿室、普通保护性隔离室、供应室洁净区、烧伤病房、重症监护病房。Ⅲ类环境区域包括儿科病房、妇产科检查室、注射室、换药室、治疗室、供应室清洁区、急诊室、化验室。　　Ⅲ类≤500cfu/m3二楼Ⅱ类≤200cfu/m3Ⅲ类≤500cfu/m3三楼Ⅱ类≤200cfu/m3Ⅲ类≤500cfu/m3