玉米素和玉米核苷检测方法.doc

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1、玉米素和玉米核苷检测方法1、原理试样经甲醇提取、浓缩并净化后，用高效液相色谱法检测，外标法定量。2、试剂以下试剂，除特殊说明外，均为分析纯。1）甲醇：色谱纯。2）冰乙酸。3）玉米素、玉米核苷标准品。4）0.8%冰乙酸溶液：准确称取0.8mL冰乙酸，加水并定容至100mL。5）0.1mg/mL玉米素（玉米核苷）标准液：准确称取0.010g玉米素（玉米核苷）标准品于100mL容量瓶中，用流动相溶解并定容至刻度。3、仪器高效液相色谱仪：配紫外检测器。分析天平：感量0.0001g一台。超声波清洗器。容量瓶：25mL、100mL。微孔滤膜：0.45μm。4、测定4.1样品制备准确称取样品0.10g，

2、置于25mL容量瓶中，加约20mL甲醇，在超声水浴中超声20min，用甲醇定容至刻度，放置4h后经0.45μm滤膜过滤，备用。4.2标品处理将配制的标准液经0.45μm滤膜过滤，过滤后所得滤液作为对照溶液。4.3测定4.3.1色谱条件色谱柱：C18色谱柱，150mm×4.6mm，5μm，或性能相当者。流动相：甲醇：0.8%冰乙酸溶液=20：80。紫外检测器：波长为268nm。柱温：30℃。流速：1.0mL/min。进样体积：20μL。4.3.2色谱分析分别注入20μL玉米素（玉米核苷）标准液及试样溶液，按上述列出的条件进行液相色谱分析测定，记录峰面积，响应值均应在仪器检测的线性范围之内。根

3、据标准品的保留时间定性，外标法定量。4.4结果计算样品中玉米素（玉米核苷）含量（X）以毫克每克（mg/g）表示，按下式计算：式中：X：样品中玉米素（玉米核苷）含量，单位为毫克每克（mg/g）。A2：样品峰面积。c:玉米素（玉米核苷）标准液浓度数值，单位为毫克每毫升（mg/mL）。V：试样体积，单位为毫升（mL）。A1：标品峰面积。M：样品质量，单位为克（g）。5、方法定量检出限本方法定量检出限为：2mg/g。