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时间:2020-07-01
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1、第三章消毒与灭菌_总结介绍几个基本概念1.灭菌:应用物理或化学方法杀灭物体中所有的病原微生物、非病原微生物以及芽胞和霉菌孢子的方法。2.消毒:应用物理或化学方法杀灭物体中的病原微生物,而对非病原微生物及芽胞,孢子不要求全部杀死。3.防腐:应用物理或化学方法阻止和抑制微生物的生长繁殖的方法。4.无菌操作法:防止或杜绝一切细菌进入动物体或其他物体的方法。5.滤过除菌:液体或气体通过滤过作用除去其中所存在的细菌。一般用0.22微米滤膜,但不能除去病毒,霉形体及L型细菌。第一节物理因素n温度n干燥n渗透压n辐射n过滤n其他物理因素一、温度(一)高温对微生物的影响n高温对微生物有
2、明显的致死作用,其主要原因是高温能使菌体蛋白质变性或凝固,酶失去活性,核酸结构遭到破坏等,从而导致其死亡。n多数细菌,酵母菌和霉菌的营养细胞和病毒在50-65ºC10min可以致死。n细菌芽孢,在121ºC下5-20min才能致死,n同种微生物老龄菌比幼菌耐热。n干热灭菌(dryheatsterilization)焚烧灭菌法:常用于废弃物动物尸体等处理。烧灼灭菌法:是直接火焰灭菌,如接种环灭菌。烘烤灭菌法;实验室用干燥箱烘。一般是160℃2小时即可达到灭菌目的。n湿热灭菌(mosistheatsterilization)在同温度下,湿热灭菌的效果比干热灭菌好;因为:a比
3、干热更易使菌体蛋白凝固。b湿热穿透力强;c湿热可以释放大量潜热。n湿热灭菌法A.高压蒸汽灭菌法B.煮沸消毒法C.流通蒸汽消毒法D.间歇蒸汽灭菌法E.巴氏消毒法A、高压蒸汽灭菌法是湿热灭菌中最好的方法,通常1.05kg/cm2,的压力下面(此时温度121ºC)处理15-30min。要排冷空气,否则会形成假压力,虽然压力达到要求,温度却达不到相应温度,而影响灭菌效果。B、煮沸消毒法物品在水中煮沸15min,可杀死所有营养细胞和一部分芽孢。在水中加入1%的Na2CO3或2-5%的石碳酸效果更好。此法适合注射器和解剖用具的消毒。C、间歇灭菌法(fractionalsterili
4、zation)a)是用常压蒸汽反复几次进行灭菌的方法。b)主要用于不宜高压灭菌的培养基,不耐热的药物和营养物等c)方法是将待灭菌物品置于蒸锅内加热到沸腾维持15-30min杀死营养细胞,取出冷却后在37℃恒温培养24小时,使芽孢萌发,再用此法灭菌,反复三次,即可达到灭菌目的。D、巴氏消毒法(pasteurization)a)是食品(牛奶)酿造(啤酒)工业中常用的方法。b)具体做法是63-65℃处理30min或71~72℃度处理15s,速冷却至10℃下。c)这样即可杀死病原微生物。又不致损坏营养,可保留食品饮料原有风味。d)为节省时间,又达到巴氏消毒的效果,现多用高温瞬时
5、灭菌132℃下1-2s。(二)低温对微生物的影响①常温冰箱保存细菌和病毒:(细菌4~0℃;病毒-20℃~-70℃)。②低温保存食品应迅速冷冻,否则扰乱细胞胶体状态,使水分形成结晶,冰结晶还能机械地刺伤菌体胞膜,胞壁。③冷冻真空干燥法:采取迅速冷冻和抽真空除水原理;如冻干疫苗和冻干菌种。二、干燥水分是微生物的正常生命活动必不可少的。干燥会导致细胞失水而造成代谢停止以致死亡。微生物的种类,环境条件,干燥的程度等均影响对微生物杀灭的效果。休眠孢子抗干燥能力也很强,在干燥条件下可长期不死,这一特性已用于菌种保藏,如用砂土管来保藏有孢子的菌种。在日常生活中也常用烘干、晒干和熏干等
6、方法来保存食物。三、渗透压细菌处于低渗液中,细胞会吸水膨胀乃至破裂,称胞浆压出。细胞处于高渗液中会脱水,引起细胞质和细胞壁分离,称质壁分离,导致死亡。等渗溶液对微生物生长有利四、辐射辐射是能量通过空间传递的一种物理现象。可见光线肉眼可见的光线是在红外线和紫外线之间,波长为400~800nm。日光利用日光暴晒是常用的简易消毒方法,许多细菌繁殖体在日光直射下2h很易死亡。紫外线:波长200~300m的紫外线具有杀菌作用杀菌机理:干扰DNA的复制与转录特点:紫外线穿透力较弱应用范围:不耐热物品的表面消毒电离辐射:包括高速电子、x射线和γ射线。杀菌机理:产生游离基,破坏DNA。
7、应用范围:一次性医用塑料制品的消毒,食品的消毒不破坏其营养成分。五、滤过除菌法n滤菌器:用物理阻留的方法,将液体或空气中的细菌除去,以达到除菌目的。含有微细小孔<0.22微米,只允许液体或气体通过,而大于孔径的细菌等颗粒不能通过。n适用范围:血清、毒素、抗生素以及空气等的除菌。六、其他物理因素n超声波超声波是由超声波发生器产生的,对细胞有破坏作用,能使大多数细胞裂解死亡。n微波微波是一种波长短而频率较高的电磁波。微波对微生物的杀菌作用,主要是由于微生物在微波电磁场作用下,吸收微波的能量而产生热效应所致。第二节化学因素n各种消毒剂可按其作用
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