光学显微镜基础知识.ppt

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1、奥林巴斯生物显微镜光学显微镜基础知识显微镜的光学原理象差显微镜的技术参数显微镜的光学部件基础知识显微镜成像FF’物镜显微镜成像FF’物镜显微镜成像物镜250mm＝明视距离FF’目镜基础知识光学显微镜基础知识显微镜的光学原理像差显微镜的技术参数显微镜的光学部件理想成像点标本投影图像点平面平面图形准确相似图形像差实际图形点标本投影图像虚的圆平面弯曲的面图形变形的图形像差象差的种类球差象散慧差畸变场曲色差基础知识象差球差象散慧差场曲负畸变正畸变基础知识场曲基础知识基础知识ACHPLANACH场曲ＡＣＨ　　　　　　　ＰＬ色差基础知识色差校正对照色差校对无校对校对基础知识光学显微镜基础

2、知识显微镜的光学原理像差显微镜的技术参数显微镜的光学部件显微镜的技术参数数值孔径分辨率工作距离焦深放大倍率同焦距同轴度基础知识数值孔径(N.A)基础知识分辨率基础知识ΔR=kλ/NAΛ：波长NA：数值孔径K常数:K光镜=0.61；KFV=0.51数值孔径大分辨率高基础知识NA与焦深基础知识工作距离(W.D)基础知识工作距离不需要盖玻片有盖玻片同焦距（齐焦距离)基础知识同轴度基础知识比如10倍物镜下的中心转换到40倍是仍然几乎是中心柯勒照明和临界照明基础知识临界照明柯勒照明基础知识厚标本和薄标本4-5um2um基础知识基础知识光学显微镜基础知识显微镜的光学原理像差显微镜的技术参

3、数显微镜的光学部件显微镜的主要光学部件物镜目镜聚光镜基础知识物镜基础知识物镜的种类按色差和场曲校正程度分:消色差物镜（Ach)平场消色差物镜(PlanAch)平场半复消色差物镜(Plan-FL或PLFL）平场复消色差物镜（PlanApo)平场超级复消色差物镜（PlanSApo)基础知识VIS－NIR范围内优异的色差校正信噪UPLSAPO物镜消色差Ach–蓝(486nm)和红(657nm)半复消色差Fluorite–兰和红+(绿,紫色(437nm))复消色差Apo–437-657nm超级复消色差SuperApo–430-1000nm物镜的色差校正轴向色差侧向色差ACH消色差Ac

4、h–蓝(486nm)和红(657nm)半复消色差Fluorite–兰和红+(绿,紫色(437nm))复消色差Apo–437-657nm超级复消色差SuperApo–430-1000nm物镜的色差校正轴向色差侧向色差ACHFLIRIR消色差Ach–蓝(486nm)和红(657nm)半复消色差Fluorite–兰和红+(绿,紫色(437nm))复消色差Apo–437-657nm超级复消色差SuperApo–430-1000nm物镜的色差校正轴向色差侧向色差ACHFLApo消色差Ach–蓝(486nm)和红(657nm)；绿球差半复消色差Fluorite–兰和红+(绿,紫色(437

5、nm))；绿、兰球差复消色差Apo–437-657nm，绿、兰、深兰球差超级复消色差–430-1000nmSuperApo物镜的色差校正轴向色差侧向色差ACHFLSApoIRIRApo消色差物镜基础知识复消色差物镜半复消色差物镜传统物镜的符号基础知识新物镜的符号基础知识其它物镜基础知识浮雕相称物镜无应力偏光物镜相称物镜超低倍物镜带校正环物镜基础知识对载波片和盖玻片厚度的要求基础知识载玻片:0.9-1.4mm盖玻片:0.17mm无盖片物镜基础知识物镜光阑的运用光阑全开启光阑适当关小——荧光观察中应用目镜基础知识目镜的视场基础知识F.N.22标本的视场直径标本的视场直径=目镜视场

6、数/物镜倍率例:WH10X目镜视场数为22物镜为UPLFL40X视场直径=22÷40=0.55mm基础知识聚光镜显微镜的调节瞳距调节屈光度调节光路转换聚光镜中心孔径光栏设置瞳距调节屈光度调节调节光路转换100%80%20%100%聚光镜中心调节⑤光轴中心调节螺钉③视场光阑③孔径光阑②10X物镜①标本④聚光镜升降旋钮孔径光栏调节N.A聚=(0.6-0.8)N.A物孔径光栏开度与图象100%70%30%HRLCHCLRMRMC孔径光栏的运用孔径光栏的运用对比度调节奥林巴斯显微镜无限远光学系统——UIS显微镜无限远光学系统——UIS有限远无限远UIS光学系统MeritoftheIn

7、finitysystem物镜D/M重影平行光线结像透镜UIS系统UniversalInfinitySystem————万能无限远系统1.完美结合分辨率和对比度-明场高分辨率-高对比度、高亮度图像-清晰的DIC图像-更敏感的偏光观察-清晰、色彩明亮的相衬UIS系统UniversalInfinitySystem2.系统灵活性-无限远校正光学系统-物镜和结像透镜完全校正3.物镜万能性更强-AsingleuniversalobjectivelensperformsverywellinFluorescence,N