实验四 浮游植物采集和 定量.ppt

《实验四 浮游植物采集和 定量.ppt》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、实验四浮游植物采集和定量一、实验目的：1.掌握浮游植物采集、浓缩的常用方法；2.了解浮游植物计数框的结构；学习、掌握浮游植物计数的方法。二、实验原理：应用显微镜的成像原理，并借助浮游植物计数框，计算单位体积浮游植物的数量。三、实验仪器、用品广口瓶、乳胶管（医用输液管）、浮游生物网、量筒、鲁哥氏液（碘液）、甲醛、标签纸。光学显微镜、100µl移液枪、浮游植物计数框调查工具1、采水器2.浮游生物网采用特种尼龙布制成，网口圆形，网底呈圆锥状开口，网底开口处扎系开关阀门。定性样品采集(针对浮游植物、原生动物和轮虫等)采用25﹟浮游生物网(网孔0.064mm)；枝角类和挠足类等浮游动物采用13﹟浮

2、游生物网(网孔0.112mm)，在表层中拖滤1～3min。3、透明度盘4、广口瓶（标本瓶）4.浮游植物定量：5.浮游动物定量：四、实验内容：1.采样点的选择。海洋采样点的选择应与环境监测站相一致，或根据污染、赤潮发生范围等确定采样点。2.采样层次、采水量及采样次数。水深15m以内的浅海，采表（水下0.5m）、底两层；水深大于15m，采表、中、底（距底0.5m）三层。可分层采水，也可以各层采水等量混合采得1000ml水样后装入广口塑料瓶，应立即加入10-15ml碘液（即鲁哥氏液）固定。每一瓶都应有标签标明时间、地点、站号、样品号、采水量、水层、温度等。采样次数：可以每月一次，一般每季度采样

3、一次，最少要春季和夏末秋初各采一次。鲁哥氏液配置方法：将6克碘化钾溶于20ml水中，待其完全溶解后，加入4克碘充分摇动，待碘全部溶解后定容到100ml。固定浓度为1L水样加10-15ml鲁哥试剂。定量样的采集采集对象采样量（升）藻类1～2原生动物、轮虫微小甲壳动物1～5成熟甲壳动物10～50四、实验内容：3.定量样品沉淀与浓缩所采水样摇匀后倒入沉淀器中静置，使浮游植物完全沉淀。沉淀是一种圆柱形分液漏斗。如无沉淀器也可用量筒、烧杯或在原水样瓶中静置沉淀。静置沉淀24-48h后。再用乳胶管或橡皮管（医用输液管）利用虹吸原理小心地抽出上部不含藻类的清液。一般约剩下20-40ml沉淀物转入30或

4、50ml的定量瓶中，用上述清液冲洗沉淀器2-3次，洗液仍倒入定量瓶中使水量恰好达到30或50ml。然后贴上标签，标签上要记载采集时间、地点、采水量、站号、样品号、水层和温度。四、实验内容：3.沉淀与浓缩虹吸动作要十分仔细、小心。开始时虹吸管一端放在沉淀器内约三分之二处，另一端套接在已经用手挤压出空气的橡皮球上，然后轻轻松手并移开橡皮球使清液流出，为了避免漂浮水面的一些微小藻类进入虹吸管而被吸走，管口应始终低于水面。虹吸管内清液的活动不宜过快，可用手指轻捏管壁以控制流量，当吸到原水样的3/5以上时，应使清液一滴一滴地流下。吸出的清液要用一洁净的器皿装盛，以便在浓缩过程在出故障时，可重新倒入

5、沉淀器中浓缩，不必新采水。将样品倒入量筒中沉淀浓缩直接在广口瓶中浓缩，但要确定体积4.浮游植物定性：浮游植物样品采集参照文献(国家环保总局，2002)的方法。定性样品用孔径约0.064mm的25号浮游生物网在水面下约0.5m处以适当的速度作“∞”字形来回拖动1～3min，获得的浓缩样分为两份，一份立即用适量的鲁哥氏液固定，另一份活体样品于24小时内镜检。5.计数：计数一定体积内的浮游植物种类和数量显微镜计数方法选择：采用行格法或镜头法，确定计数行格和镜头内的浮游植物种类和数量。行格法一般每片计数3、5、8行/列中的植物；镜头法必须确定观察镜头（即视野光圈）的直径/面积，通过随机移动镜头，

6、计数所有镜头内的藻类。行格法按照计数玻片上的格子确定技术范围，玻片样品池长x宽=20mmx20mm，即每列长x宽=20mmx2mm计数水样体积=0.001mlx计数格数镜头法需量测量镜头的直径d，实验室目前常用的镜头的视野直径：d1=2000um（10x），1000um（20x），500um（40x）d2=1800um（10x），900um（20x），450um（40x）镜头面积=πr2。使用的工具有：100µl移液枪（带有0.1毫升刻度的小吸管），容量为0.1毫升的计数框（面积20ⅹ20毫米2）和具有移动台的显微镜。用前可浸入70%的酒精中，用时取出，用细绢拭净，计数框用前以薄绸布拭净

7、，用毕以水弄湿后轻拭或用水冲净。取样计数时应注意以下方面：将浓缩沉淀后水样充分摇匀（倒转摇）后，立即用0.1ml吸量管吸出0.1ml样品，注入0.1ml计数框内，小心盖上盖玻片（20×20㎜2），在盖盖玻片时，要求计数框内没有气泡，样品不溢出计数框。然后在显微镜下计数。在400-600倍的显微镜下观察计数，每个水样标本计数两次（二片），取其平均值，一每片计数100个视野，但具体观察的视野数以样品中浮游植物多少而酌情增减，如果平均每个