酶标仪使用详解.ppt

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1、酶标仪使用详解工作原理酶标仪测定的原理是在特定波长下,检测被测物的吸光值。在特定波长下测定每一种物质都有其特定的波长,在此波长下,此物质能够吸收最多的光能量。如果选择其它的波长段,就会造成检测结果的不准确。因此,在测定检测物时,我们选择特定的波长进行检测,称为测量波长。注意这里提出了两个关键概念OD值(吸光值)和波长。常用酶标仪雷勃-MK3常用酶标仪科华ST-360酶标板96孔透明酶标板酶标仪基础设置增加酶标仪仪器设置内容仪器类别必须选择“酶标仪”酶标仪设置波长振板频率振板时间进板方式空白形式酶标仪项目设置项目设置项目性质必须选择”酶标仪目”阳性公式阳性公式:OD>=NC*2.5弱阳性公式

2、阳性公式:OD>=NC*2.1CutOff公式NC*2.1控制界面酶标板酶标板组成酶标板是由12*8个孔组成的,每一个孔可以理解为一个标本。每一板中还需要设置和阳性公式相关的孔阳性、阴性、空白等。酶标项目每一行可以设置一个酶标项目(下拉方式),可以设置为单板单项和单板多项。酶标板每一个孔代表可以设置的含意普通(纯数字)=标本号空白孔=(BC+N)阴性孔=(NC+N)阳性孔=(PC+N)质控孔=(QC+N)酶标板空白对照=(BC1+BC2+BC3…)/N阴性对照=(NC1+NC2+NC3…)/N阳性对照=(PC1+PC2+PC3…)/NCutoff=Cutoff公值的计算值酶标板模板可以把当

3、前设置好的酶标板保存为模板,供以后使用。标本号设置可以使用拖动的方式增加标本号,标本号生成可以分为横行和纵向。酶标板酶标板的显示内容样本编号=标本号原始OD值=仪器传回来没有减去空白的OD值(OD值=吸光度值)OD值=根据参数来判断是否要减去空白孔的值(BC)。定性值=根据公式计算出孔是阴性、阳性、弱阳性双波长测量介绍使用参考波长过滤一些环境因素(样本的浊度、干扰色、噪音、漂移、电压),使结果更稳定。使用双波长测量是不需要设置空白孔的。对一些比较敏感的项目最好使用双波长如HIV。双波长测量只需要设置了参考波长程序就认为当前要使用双波长进行测量。难点:怎样确认当前波片的波长。酶标板项目设置单

4、板单项一个酶标标只有一个项目,常用于标本量比较大的时候。单板多项一块板可以做多个项目,注意项目是横向排列的而且每个项目都必须设置公式中需要的阴性阳性孔。工作流程练习按要求建立酶标项目。(见练习文档提纲十)

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