ABI 7500 FAST荧光定量PCR仪 操作规程.doc

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1、ABI7500FAST荧光定量PCR仪简明操作规程1.双击桌面图标，或从Start>AllPrograms>AppliedBiosystems>7500Software>7500V2.0开启软件。进入主界面后选择AdvancedSetup。2.默认进入Setup下的ExperimentProperties界面2.1输入实验名称（ExperimentName）2.2确认仪器型号2.3在实验类型中，选择Quantitation-ComparativeCT(△△CT)2.4选择试剂种类2.5确认运行模式3.进入Setup下的PlateSetu

2、p界面，编辑基因（Target）及样本（Sample）；3.1在“definetargetsandsamples”界面中设置基因3.2在“assigntargetsandsamples”中进行样品板的排布。4.在“Selectrelativequantitationsetting”中设置内参基因及对照样本。5.进入RunMethod界面，设定反应条件及反应体积。6.点击“save”按钮，文件储存成ExperimentDocumentSingleFiles（*.eds）格式，然后在Run界面按下按钮，反应即开始进行。7.实验结束后，点击界

3、面右上角的Analyze按钮，软件将会显示实验结果：7.1在扩增图中（见上图），可通过更改PlotSettings来改变扩增图的显示方式。如果想查看阈值线或基线，请将Threshold及Baseline打勾。7.2查看相对表达量结果时，利用PlotSettings选项，可以以不同方式显示相对表达量的结果。7.3对于SYBRGreen法实验，可以在MeltCurve界面中查看熔解曲线。7.4检测QCSummary结果，可以快速查看实验中是否有反应孔存在异常情况。黄色三角形中的数字1代表有一种异常情况，2代表有两种异常情况，以次类推。详细信

4、息及解决方案可以在FlagDetails中看到。8.分析之后的结果，可以利用菜单中的File>Export功能，导出Excel格式的结果。若想存储图片结果，可直接在图片上单击鼠标右键，选择Saveas，存成JPEG格式的图片。使用注意事项1.本设备必须使用规格为100uL的八连管或者96孔反应板；2.加样操作时请戴手套，保持八连管或者96孔反应板盖部清洁，以免影响荧光读取；3.实验数据请使用实验中心专用优盘拷贝，请勿私自使用个人优盘拷贝。