副猪嗜血杆菌感染的诊断和防制策略.doc

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1、猪与禽第23卷第2期2003年3月4副猪嗜血杆菌感染的诊断和防制策略袁森泉译自《PigProgress》RespiratoryDisease(special)2002,22~25林颖校通过预防性免疫接种和抗生素治疗,可以防制副猪嗜血杆茼感染。但是,要成功地防制全身性疾病,就必须作出准确的诊断,并要了解受害猪群中副猪嗜血杆茵的流行病学。副猪嗜血杆菌(Haemophillusparasu~’s)仍然是许多养猪生产者关心的主要问题。副猪嗜血杆菌独自或者与其它微生物(比如猪链球菌或猪繁殖和呼吸综合征病毒)一起造成的死亡,可使保育期死亡率达到10%之高。副猪嗜血杆菌引起的疾病可早在

2、保育舍内最初2周时就开始出现,并一直持续到肥育期早期。感染高峰通常见于保育期的4~6周。通常可见到副猪嗜血杆菌定居于健康猪的上呼吸道,并常常可在鼻腔内、扁桃体内和气管前段分离到,而不见其引起任何临床症状。但是,副猪嗜血杆菌的有些菌株会破坏上呼吸道的防卫机制从而在敏感猪引起全身感染。这些菌株可能是致病性的,可引发Glasser氏病的特征性病变,即纤维素性多发性浆膜炎、关节炎和脑膜炎。副猪嗜血杆菌有时候可引起肺部病变。与副猪嗜血杆菌感染有关的临床症状通常是非特异性的。全身感染的特征是高热(104.5~107.5。F)、虚脱、食欲不振、呼吸困难、关节肿胀、肢端发红以及中枢神经系

3、统症状(比如运动失调和战栗)。可发生猝死,这种情况下常常缺乏眼观病变。正确呈送样本要作出副猪嗜血杆菌感染的诊断,必须从表现临床症状和病变的猪分离到这一细菌。然而,副猪嗜血杆菌是一种要求很高的细菌,从临床病料中进行分离常常不能获得成功。在呈送供分离副猪嗜血杆菌的病料时遵守一定的原则,可大大提高确诊的机会(表1)。对于出现了临床症状而未加治疗的猪实施安乐死,并尽快采集其组织器官病料在冷藏条件下送检,可成功地分离到病原。猪与禽第23卷第2期2003年3月4最近,采用聚合酶链反应(PCR)技术提高了副猪嗜血杆菌感染诊断的灵敏度。PCR试验与传统微生物学方法相比有若干优点。应用这一

4、技术不需要对分离的菌株进行培养和生化鉴别,甚至可检测无活力的细菌。尽管PCR技术非常有助于确定副猪嗜血杆菌与猪死亡的关系,但如果要进行自家菌苗接种,就总还是要进行病原分离。选择具有代表性的样本去作副猪嗜血杆菌PCR试验或进行病原分离,对于作出正确诊断来说,是极为重要的。副猪嗜血杆菌是猪上呼吸道中的一种共栖菌。在采集自鼻腔、扁桃体或气管的病料中分离到这一细菌,或者得到PCR实验的阳性结果,对于评估疾病是否由副猪嗜血杆菌引起来说,是没有意义的。只应从全身各部位采集样品,比如从浆膜、心包、腹膜、关节和脑膜等处采样送检进行副猪嗜血杆菌感染诊断。组织和/或受害器官的拭子是进行PCR

5、试验和病院分离的合适样本。只有少数定居副猪嗜血杆菌可定居于出生后仅数小时的仔猪。将母猪鼻腔分离到的菌株与二个猪群中引起全身性疾病的菌株相互比较,结果表明可能致病的副猪嗜血杆菌在母猪群中的流行率很低。所以,在仔猪仍然受到母源免疫力保护的时候只有很少的个体会被群内可能致病的菌株定居。这些猪被认为是将致病菌株带人保育舍的健康带菌猪,它们就在保育舍内与敏感猪相混合。抗副猪嗜血杆菌的母源免疫力大约在仔猪5~6周龄时降低,这一时期与保育舍内副猪嗜血杆菌引起肺部病变的时间一致。不再受母源免疫力保护的敏感猪很容易因与先前的致病菌携带猪相接触而发生全身性疾病。对于副猪嗜血杆菌引起的疾病进行

6、流行病学研究,对于制定防制策略来说是极为重要的。为获得有价值的资料供免疫接种之用,必须将分离自受害猪全身各处的副猪嗜血杆菌菌株进行鉴定并进行比较。副猪嗜血杆菌可根据外膜蛋白质(OMP)特性以及血清型和基因型进行分类。已经报告了两种主要的OMP型(PAGE猪与禽第23卷第2期2003年3月4I型和Ⅱ型)以及15个血清变种群。这些技术可提供有关副猪嗜血杆菌各菌株表型特征的重要信息。但是,与分子技术(比如基因分型)相比,这一技术的识别能力很低。副猪嗜血杆菌的基因分型正在成为研究猪群内和不同猪群间感染流行病学的主要工具之一。这一技术具有较高的识别力以及对任何副猪嗜血杆菌菌株进行鉴

7、别的能力,而无论这些菌株属于哪一个血清变种群。rep—PCR技术已经成功地被用于副猪嗜血杆菌的基因分型。采用rep—PCR技术,可对特定猪群中引起疾病的流行菌株进行基因分型,并将其与以前的分离株、新的分离株、菌苗菌株和分离自来源猪群的菌株进行比较。这些信息对于副猪嗜血杆菌的防制都是极为重要的。另一个需要加以考虑的有趣因素是,只有少数几种菌株会在特定的猪群引起全身性疾病,而与从同一猪群的猪上呼吸道分离到的菌株的变异性无关。最近,在美国10个猪场用rep—PCR指纹技术对副猪嗜血杆菌进行的分子流行病学调查表明,一般只有1~3种流行

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