液相色谱教程.ppt

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1、液相色谱基础知识（一）色谱原理及分类历史回顾1906‘s-MikhailSemenovichTswett(1872-1919)0NNNNMgCHCH23CH3CH3HC30CH3CH3CH30CH300碳酸钙吸附剂石油醚1940‘s-分配色谱和纸色谱1950‘s-气相,薄层，凝胶过滤色谱梯度洗脱色谱M.S.Tswett.Ber.Dtsch.Bot.Ges.24:384-393(1906)1960‘s-商业高效液相色谱.柱色谱装载样品装载溶剂重力洗脱玻璃柱硅胶氧化铝纤维素糖类粉末滤网1050100150Volume(mL)Time(

2、hr)1.02.03.04.0高效液相色谱进样口检测器色谱图色谱柱溶剂泵混合器(HPLC)SeparationsInjectorDetectorColumnSolventsMixerPumpsChromatogramStartInjectionmAUtimeHighPerformanceLiquidChromatographSeparationsInjectorDetectorColumnSolventsMixerPumpsChromatogramStartInjectionmAUtimeSeparationsInjectorDe

3、tectorColumnSolventsPumpsMixerChromatogramStartInjectionmAUtimeSeparationsInjectorDetectorColumnSolventsPumpsMixerChromatogramStartInjectionmAUtimeSeparationsInjectorDetectorColumnSolventsPumpsMixerChromatogramStartInjectionmAUtimeSeparationsInjectorDetectorColumnSolv

4、entsPumpsMixerChromatogramStartInjectionmAUtimeSeparationsInjectorDetectorColumnSolventsPumpsMixerChromatogramStartInjectionmAUtimeSeparationsInjectorDetectorColumnSolventsPumpsMixerChromatogramStartInjectionmAUtimeSeparationsInjectorDetectorColumnSolventsPumpsMixerCh

5、romatogramStartInjectionmAUtimeSeparationsInjectorDetectorColumnSolventsPumpsMixerChromatogramStartInjectionmAUtimeSeparationsInjectorDetectorColumnSolventsPumpsMixerChromatogramStartInjectionmAUtimeSeparationsInjectorDetectorColumnSolventsPumpsMixerChromatogramStartI

6、njectionmAUtimeSeparationsInjectorDetectorColumnSolventsPumpsMixerChromatogramStartInjectionmAUtimeSeparationsInjectorDetectorColumnSolventsPumpsMixerChromatogramStartInjectionmAUtimeSeparationsInjectorDetectorColumnSolventsPumpsMixerChromatogramStartInjectionmAUtimeS

7、eparationsInjectorDetectorColumnSolventsPumpsMixerChromatogramStartInjectionmAUtime（二）基本概念和术语液相色谱名词术语（五）分离原理术语理论塔板数（N）：用于定量表示色谱柱的分离效率（简称柱效）。是分离效率的量度。分离度（R）：相邻两峰的保留时间之差与平均峰宽的比值。表示相邻两峰的分离程度。R≥1.5称为完全分离。（三）液相色谱仪的组成液相色谱仪的组成硬件部分输液系统进样系统分离系统检测器软件部分——色谱数据处理系统输液系统包括溶剂柜、真空脱气机、

8、溶剂混合器、高压泵等，其中核心部分是泵；泵的作用：提供足够的驱动力使流动相通过填充紧密的色谱柱洗脱方式等度洗脱：在同一分析周期内流动相组成保持恒定，适合于组分数目较少，性质差别不大的样品。梯度洗脱：采用两种（或多种）不同极性的溶剂，在分离过程中按一