丝裂素激活蛋白激酶在良性前列腺增生中的表达及临床意义.doc

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1、ERK在良性前列腺增生)I»的表达及意义张立春⑴，李凯⑺,王平⑺中国医科大学附属盛京医院急诊科；中国医科大学附属第四医院泌尿外科，辽宁沈阳U0003【摘要】日的对比研究ERK在增生与正常前列腺组织中的表达，探讨良性前列腺增生发病机制。方法采用WesternBiol及免疫组织化学方法，检测增生及正常前列腺组织中ERK的表达情况。结果与正常前列腺组织相比，增生组织ERK的平均灰度值white〜bbck,0〜255和阳性细胞百分率明显升高ERK染色主要位于细胞核和细胞质内，在増生组织上皮细胞及基质细胞的染色阳性率

2、均高于正常询列腺组织。结论ERK在良性前列腺增生组织中过表达，从而导致细胞増生指数増加促进疾病的发生和发展。【关键词】ERK信号传导;良性前列腺增生泼病机制ExpressionofERKinBenignProslaticHyperplasiaanditsClinicalSignillcanceZHANGLichun,LIKai,WANGPing(1)TheAffiliatedSHENGJINGHospital;(2.)DepartmentofUrinarySurgery,FourthAffiliatedHo

3、spital,ChinaMedicalUniversity,LiaoningShenyang110001China[Abstract]ObjectiveToinvestigatetheexpressionoferkinbenignprostalichyperplasia(BPH)andnormalprostatictissueandexplorethemolecularbiologymechanismofpathogenesisofBPH.MelhodsTodetecttheexpressionofextr

4、acellularsignalregulatedkinase(ERK)in64casesofBPHand16casesofnormalprostateswithwesternblotanalysisandimmunohistochemicaltechniques・ResultsTheaveragegrayvalueofERKandpercentageofERKpositivecellswerehigherinBPHcomparedwithnormalprostatesPv0・01・Theimmunostai

5、ningproductofERKwasmainlylocatedinnucleiandcytoplasm,andthepositivestainingratesofepithelialcellsandstromalcellsinBPHwerehigherthanthatinnormalproslateprominentConclusionTheoverexpressionofERKleadingtotheincreaseofproliterativeindexofcellsleadingtothedecre

6、aseofapoptosismaybeinvolvedinthedevelopmentofBPH・【Keywords]MAPK;signaltransduction;benignprostatichyperplasisBPH;pathogenesisMAPK是细胞内信号传递途径的共同通道和汇聚点rLo在Weinberg等曾报道，有丝分裂原通过激活MAPKs促使细胞增生⑵。本研究通过对比检测良性增生及正常前列腺细胞屮ERK的表达，探讨BPH发病的分子机制。1材料与方法111标本来源和主要试剂医大一院2003年

7、6月〜2004年6月经手术切除的增生前列腺组织64例，年龄57〜73岁,标本均由耻骨上前列腺摘除术获得。从厂检屮获取的正常前列腺组织12例作为对照，年龄24〜35岁。所有标本均经两位资深病理医师确认，且资料完整。切下的组织标本立即用预冷的PBS冲洗后，30min内置于液氮屮，以后送于・70°C的冰箱屮保存待检。Western杂交ERK[抗及II抗为promega公司产詁，购自北京原平皓生物公司;免疫组化SABC试剂盒及DAB显色剂为武汉博士德生物公司产品。112实验方法WesternBlot:①提取各组织标

8、本胞浆蛋白:取等重的各样品，加5倍于湿重的粉碎缓冲液，剪碎组织并用冰水浴超声粉碎，离心后取其上清即为胞浆蛋白。将胞浆蛋白进行蛋白定量，调定至等蛋白浓度备用。②蛋白定量:采用考马斯亮兰法进行蛋白定量。1.3图像分析及统计学处理：WesternBlot杂交带的测量采用化学荧光图象分析软件(FlouchemV2.0),计算电泳条带的平均灰度值(等面积分析法)。该系统测得纯白值为0,纯黑值为255,所得结果均行去背景处理