猪肺炎支原体P97R1抗原免疫刺激复合物的制备及对活疫苗免疫刺激能力的增强作用研究.pdf

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1、第35卷第12期中国预防兽医学报VO1．35．NO．122013年12月ChineseJournalofPreventiveVeterinaryMedicineDec．2013doi：10．3969~．issn．1008—0589．2013．12．15猪肺炎支原体P97R1抗原免疫刺激复合物的制备及对活疫苗免疫刺激能力的增强作用研究韦艳娜，熊祺琰，董璐，冯志新，邵国青(江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室／国家兽用生物制品工程技术研究中心，江苏南京210014)摘要：为增强肌肉注射免疫条件下猪肺炎支原体(Mhp)活疫苗的免疫刺激能力，并补充其缺乏

2、的针对重要黏附因子P97R1的应答，本实验采用透析法制备含有P97R1的免疫刺激复合物(ISCOM．P97R1)，并将ISCOM—P97R1作为活疫苗的佐剂，通过小鼠模型进行免疫学评价。结果表明，电镜下观察所制备的ISCOM．P97R1具有ISCOM的典型蜂窝状结构，直径为30nm~40am，P97R1蛋白的包封率可达85．6％。免疫后7d即可在小鼠血清中检测到高水平的特异性P97R1抗体，并且其针对Mhp全菌蛋白的抗体也显著高于无佐剂的活疫苗对照组。结果表明，ISCOM．P97R1对Mhp活疫苗免疫刺激能力具有显著的增强作用，同时可以有效诱导产生针对P97R1的免疫应答

3、，进一步增强了疫苗的保护能力。关键词：免疫刺激复合物；P97R1；猪支原体肺炎；活疫苗中图分类号：$852．62文献标识码：A文章编号：1008．0589(2013)12—1016-04PreparationofMycoplasmahyopneumoniaimmunostimulatingcomplexofP97R1andtheenhancementofISCOM—P97R1totheimmunostimulatingeffectonthelivevaccineWEIYan-na，X10NGQi—yan，D0NGLu，FENGZhi-xin，SHAOGuo-qingfNa

4、tionalCenterforEngineeringResearchofVeterinaryBio—products．KeyLaboratoryofVeterinaryBiologicalEngineeringandTechnologyMinistryofAgricultural，InstituteofVeterinaryMedicine，JiangsuAcademyofAgriculturalSciences，Nanjing210014，China)Abstract：Toinvestigatetheenhancementofimmunostimulatingcomple

5、xcontainingP97R1antigen(ISCOM-P97R1)totheimmunostimulatingeffectoftheMycoplasmahyopneumoniaelivevaccineviaintramuscularinjection，aswellasitsefecttosupplementtheimmuneresponsetotheimportantadhesionsP97R1，ISCOM—P97R1waspreparedbydialysismethod，whichwassubsequentlyusedasanadjuvantforthelivev

6、accine．Theimmunologiceffectwasevaluatedinthemicemode1．ThepreparedISCOM—P97R1，withasizeof30nDqto40nlTl，showedacage．1ikestructureunderelectronmicroscope．Theentrapmentrateofproteinpreparedwas85．6％．Inaddition．Oneweekaftertheinoculation．thehighlevelsofantibodyagainstP97R1andwholeM．hyopneumonia

7、eproteinscouldbedetectedintheserumofthemiceimmunizedwiththeISCOM．P97R1adjuvantedlivevaccine，whichwassignificantlyhigherthanthatinthemousegroupimmunizedwiththelivevaccinewithouta~uvant．Inconclusion，ISCOM—P97R1showedasignificantenhancementtostimulateimuneresponseonthe