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1、探究:培养液中酵母菌种群数量的变化目的要求1、学习利用血球计数板进行微生物计数的方法2、实验探究培养液中酵母菌种群数量的变化3、注意样方法的应用4、体会影响种群数量变化的因素1、酵母菌的繁殖方式主要是:2、酵母菌的呼吸方式是:兼性厌氧(可进行有氧呼吸和无氧呼吸)回顾思考:出芽生殖3、酵母菌的培养条件要注意那些问题?比如要用适宜的温度培养,调节好PH值,溶氧量的控制等。例如:酵母菌的种群数量在营养条件有限的情况下呈S型增长。探究:培养液中酵母菌种群数量的变化介绍:血球计数板的构造1、血球计数板:可用来测量细胞,细菌等一些微小物体的长度,还有就是测量数量,如单位体积细胞的数量。血球计数板是由
2、一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的.玻片中有四条下凹的槽,其中间又被一短横槽隔为两半,每半边上面刻有一个方格网.25个中格16个小格16个中格25个小格25X16=400小格16X25=400小格计数室有长×宽:1mm×1mm,2mm×2mm3mm×3mm等深度均为0.1mm。5、单位换算:大方格的长和宽各为1mm,深度为0.1mm,其体积为0.1mm3.换算为1mL为0.1/1000即1/10000mL即10-4mL。4、计数室的规格:1mm1mm1mm每个计数室共有400小格,总容积为0.1mm33、使用方法:将血球计数板用擦镜纸擦净,在中央的计数室上加盖专用的盖玻片.将稀释后的酵母
3、菌悬液,用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘,使菌液缓缓渗入,多余的菌液用吸水纸吸取,稍待片刻,使酵母菌全部沉降到血球计数室内.如果使用16格×25格规格的计数室,要按对角线位,取左上,右上,左下,右下4个中格(即100个小格)的酵母菌数.6、如何计数呢?25个中格16个中格*********用规格为25格×16格的计数板,除了取其4个对角方位外,还需再数中央的一个中格(即80个小方格)的酵母菌数.(五点取样法)每1ml菌液中所含的酵母菌个数计算公式(如长和宽各为1mm):(1)16格×25格的血球计数板计算公式酵母细胞数/ml=(100小格内酵母细胞个数/100)×400×稀释倍数10-4即
4、(100小格内酵母细胞个数/100)×4×106×稀释倍数(2)25格x16格的血球计数板计算公式:酵母细胞数/ml=(80小格内酵母细胞个数/80)×400×稀释倍数10-4即(80小格内酵母细胞个数/80)×4×106×稀释倍数7、课本中大方格的长和宽各为2mm,深度为0.1mm,其体积为0.4mm3.换算为1mL为0.4/1000即4/10000mL即4×10-4mL则:每1ml菌液中所含的酵母菌个数计算公式(如长和宽各为2mm):(1)16格×25格的血球计数板计算公式酵母细胞数/ml=(100小格内酵母细胞个数/100)×400×稀释倍数4×10-4即(100小格内酵母细胞个数
5、/100)×106×稀释倍数(2)25格x16格的血球计数板计算公式:酵母细胞数/ml=(80小格内酵母细胞个数/80)×400×稀释倍数即(80小格内酵母细胞个数/80)×106×稀释倍数4×10-4使酵母菌混合均匀,减少误差不需要。因不同时间取样已形成对照需要。尽量减少误差。对每个样品计数三次,取其平均值。只计相邻两边及顶角的酵母菌稀释培养液。稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数7.对于压在小方格界线上的酵母菌应取相邻两边及顶角计数。第1天第4天第6天第7天死亡酵母菌的种群数量在营养条件有限的情况下是呈S型增长。但之后会下降。0酵母菌细胞数(×106个/mL)时间3.影响酵母菌的种群数量
6、增长的因素可能是什么?在计数前,还应有哪些步骤?需注意些什么?培养液配制灭菌接种培养无菌操作培养条件试管编号培养液/mL无菌水/mL酵母菌母液/mL温度(℃)A10—0.128B10—0.15C—100.128针对“培养液中酵母菌种群数量的动态变化”,有人提出了新的问题,某同学按下表完成了有关实验。时间(d)酵母菌细胞数量(×106个/mL)A组B组C组A1A2A3平均B1B2B3平均C1C2C3平均1234567温度、营养物质对酵母菌生长的影响1.通常用血球计数板对培养液中酵母菌进行计数,若计数室为1mm×1mm×0.1mm方格,由400个小方格组成,若多次重复计数后,算得每个小方格中
7、平均有5个酵母菌,则10mL该培养液中酵母菌总数有个。5×400×10000×10=2×1082、检测员将1mL水样稀释10倍后,用抽样检测的方法检测每毫升蓝藻的数量;将盖玻片放在计数室上,用吸管吸取少许培养液使其自行渗入计数室,并用滤纸吸去多余液体。已知每个计数室由25×16=400个小格组成,容纳液体的总体积为0.1mm3。现观察到图中该计数室所示a、b、c、d、e5个中格80个小格内共有蓝藻n个,则上述水样中约有蓝藻多少个。8