实验五 白细胞分类计数.ppt

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1、实验五白细胞分类计数一、实验目的掌握显微镜外周血白细胞分类计数（DLC）的方法；掌握外周血各类白细胞的正常形态。二、实验原理将血液制成细胞分布均匀的血涂片，用瑞氏染液染色，根据各类细胞的形态特点和颜色差异将白细胞区别并进行计数。通常计数100个白细胞，计算得出各种白细胞所占的百分率。三、实验器材与试剂器材：显微镜，香柏油，擦镜纸，清洁液试剂：Wright染液。四、实验标本：制备良好的血涂片五、操作步骤1.制备血涂片：按照正确的操作方法制备血涂片2.染色：用Wright染液对血涂片染色，冲洗干净，自然干燥后备用。3.低倍镜观察：

2、低倍镜下观察全片，包括白细胞飞分布和染色情况。4.油镜观察：选择血涂片体尾交界处细胞分布均匀、着色良好的区域，滴加1滴香柏油，按一定的方向顺序对所见到的每个白细胞进行分类，并用白细胞分类计数器做好记录，共计数100个白细胞。5.计算：求出各类白细胞所占的百分率。6.报告方式：百分率（%）。六、参考区间WBC百分率（%）绝对值（×109/L）中性杆Nst1~50.04~0.50中性分Nsg50~702.00~7.00嗜酸性E0.5~50.05~0.50嗜碱性B0~10~0.10淋巴L20~400.80~4.00单核M3~80.1

3、2~0.80七、注意事项1.计数区域：以体尾交界处最佳。2.分类方法：遵循一定的方向，以“城垛式”连续进行，避免主观选择视野；结果的记录可采用计数器、手工画“正”字或“+++++”。3.计数的白细胞数：白细胞总数在（3.0~15.0）×109/L之间者，分类计数100个白细胞；总数在15.0×109/L以上时，计数200个；总数低于3.0×109/L时，应选用两张血涂片计数50~100个白细胞。4.计数结果：用各类白细胞的百分率乘以白细胞总数，即可求得每升血液中各类白细胞数量的绝对值。5.血涂片中有有核红细胞时，应逐个计数，但

4、不计入100个白细胞内，以分类100个白细胞过程中见到的有核红细胞个数来报告，并注明其所属阶段。6.分类中还应注意观察成熟红细胞、血小板的形态、染色及其分布情况，注意有无寄生虫（如疟原虫）及其他异常所见。外周血各类白细胞的正常形态白细胞粒细胞淋巴细胞单核细胞一、白细胞的组成中性粒细胞嗜酸性粒细胞嗜碱性粒细胞——白细胞是机体抵抗病原微生物等异物入侵的主要防线全能干细胞髓系干细胞淋巴系干细胞粒-单核系祖细胞T淋巴系祖细胞B淋巴系祖细胞原粒细胞T原淋巴细胞B原淋巴细胞分叶核粒细胞单核细胞T淋巴细胞B淋巴细胞浆细胞GM-CSFT幼淋巴

5、细胞B幼淋巴细胞早幼粒细胞中幼粒细胞晚幼粒细胞杆状核粒细胞幼单核细胞原单核细胞嗜酸性粒细胞嗜碱性粒细胞中性粒细胞（Neutrophil，N）具有趋化、变形、黏附、吞噬、杀菌作用，防御和抵抗病原菌侵袭二、白细胞的功能淋巴细胞（Lymphocyte，L）B细胞浆细胞生成Ab体液免疫T细胞免疫活性物质细胞免疫单核细胞（Monocyte，M）吞噬，杀灭病原体清除损伤或已死亡的细胞处理抗原嗜碱性粒细胞（Basophil，B）通过释放嗜碱性颗粒（组胺、肝素、慢反应物质等）参与超敏反应嗜酸性粒细胞（Eosinophil，E）抑制嗜碱性粒细胞

6、和肥大细胞合成和释放活性物质，吞噬其释出颗粒，破坏组胺，限制过敏反应参与对寄生虫的免疫反应1.中性粒细胞(N)直径10-15um胞质：粉红色，含较多细小均匀的紫红色中性颗粒。胞核：染色不均三、白细胞正常形态按胞核的形态分为：N杆状核（Nst）N分叶核（Nsg）核径最窄处大于最宽处1/3为杆状核，核型多样，可呈C形、S形、V形或不规则形。核径最窄处小于最宽处1/3为分叶核，细胞分2~5叶，甚至5叶以上。中性粒细胞杆状核分叶核2.嗜酸性粒细胞（E）形态：略大于中性粒细胞胞浆：胞浆内充满粗大、整齐、均匀、排列紧密、有立体感的桔红色嗜

7、酸性颗粒胞核：长呈分叶状，二叶居多，呈眼镜状，偶见3~4叶,染色质粗，染深紫红色。嗜酸性粒细胞（血涂片）3.嗜碱性粒细胞（B）胞体呈圆形，略小于中性粒细胞胞浆：含粗大但大小不一、分布不均匀的紫黑色嗜碱性颗粒，颗粒常覆盖于核上，致使核的轮廓与结构模糊不清胞核：核分叶不明显，形态不规则。嗜碱性粒细胞（血涂片）颗粒特点大小不一分布不均嗜碱性强4.淋巴细胞（L）形态：直径6-15um，分为大L和小L。胞核：圆形或肾形，深紫红色。染色质粗糙，排列均匀，大淋巴细胞核常偏于一侧。胞浆：小淋巴极少,浆内无颗粒，常呈裸核。大淋巴胞浆丰富，呈透明

8、蓝色，常有少量粗大、大小不均的紫红色嗜天青颗粒。淋巴细胞（血涂片）5.单核细胞（M）形态：为外周血中最大的细胞，直径15-25um胞体呈圆形或不规则形。胞浆：丰富，染淡蓝色或灰蓝色，呈毛玻璃样半透明。胞浆内含大量细小、弥散分布的灰尘样淡紫红色嗜天青颗粒，可见空泡。胞核：细胞核