实验二 玻璃器皿的清洗、包扎及灭菌.ppt

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1、实验二玻璃器皿的清洗，包扎及灭菌一、目的要求1、学习并掌握玻璃器皿的清洗，包扎方法2、学习并掌握玻璃器皿灭菌的方法。二、实验原理及操作玻璃器皿一般要求硬质玻璃，才能承受高温和短暂灼烧而不致破裂；玻璃器皿的游离碱含量要少，否则会影响培养基的酸碱度；玻璃器皿的形状和包装方法要求能防止污染杂菌为准；洗涤玻璃器皿方法不当会影响实验结果1、玻璃器皿的清洗方法(1)、新购的玻璃器皿首先浸泡于１～２％的盐酸或洗涤液中数小时，最后用流水冲净。（2）、使用过的玻璃器皿的清洗方法试管、培养皿、等可用瓶刷及去污粉刷洗然后自来水冲

2、洗干净。若内壁水均匀分布成一薄层而不出现水珠，为油污完全洗净。否则，再浸泡数小时。装有固体培养基的器皿，应先将其刮去，再洗涤带菌的先浸在2%煤酚皂溶液或0.25%新洁尔灭消毒液内24h或煮沸0.5h，再洗涤带病原菌的先高压蒸汽灭菌，然后将培养物倒去，再进行洗涤玻璃吸管立即浸泡在自来水中，免得干燥后难以冲洗干净，待实验结束后集中冲洗若吸管顶部塞有棉花，则先用水将棉花冲出，再洗涤吸过微生物培养物的吸管应立即浸泡在盛有2%的煤酚皂溶液或0.25%新洁尔灭消毒液内，24h后方可取出冲洗吸管内部如有油垢，同样应先在洗

3、涤液中浸泡数小时，然后冲洗载玻片与盖玻片若滴加有香柏油，先用邹文纸擦去或浸在二甲苯里摇晃几次，再在肥皂水中煮沸5～15min用软纸或脱脂棉花擦拭，立即冲洗，然后在稀洗涤液中浸泡0.5～2h，自来水冲洗，最后用蒸馏水换洗几次，干后浸于95%乙醇中保存。使用时在火焰上烧去乙醇检查过活菌的先2%煤酚皂溶液或0.25%的新洁尔灭溶液中浸泡24h，然后按上述洗涤和保存。2、空玻璃器皿的包装（1）、培养皿的包装5~8套，旧报纸包装，干热或湿热灭菌若放入金属桶内进行干热灭菌，则不必纸包（2）、吸管的包装粗头顶端约0.5c

4、m处塞1.5cm长的棉花，报纸条包装每只吸管，与报纸约呈45°，并将左端多余的部分覆折在吸管上，再将整根吸管卷入报纸，有段多余的纸条打一小结。再用大报纸包装单只吸管，干热灭菌报纸条包装好的许多单只吸管，也可装入金属筒中干热灭菌。若一次灭菌的吸管可一次用完，也可将玻璃吸管直接放入金属筒内，管尖朝筒底，粗端在筒口，干热灭菌。使用时，筒横卧，手持粗端取用（3）、试管和三角烧瓶的包装洗净干燥后的试管和三角烧瓶，管口和瓶口塞棉花塞。许多试管装入铁丝筐内，再用大张报纸或牛皮纸捆扎，干热或湿热灭菌。三角烧瓶再用报纸或牛皮

5、纸包扎，细线捆之附：棉塞的制作棉塞的作用防止杂菌污染保证通气良好棉塞：加塞时，1／3在试管口外，2／3在试管口内。如图2-2所示。做棉塞的棉花要选纤维较长的，一般不用脱脂棉做棉塞通气塞：几层纱布（一般8层）相互重叠，或两层纱布间均匀铺一层棉花而成3、消毒与灭菌消毒：一般是消灭病原菌和有害微生物的营养体而言灭菌：则是消灭一切微生物的营养体，芽孢和孢子分类：加热法—干热灭菌，湿热灭菌过滤除菌辐射灭菌化学药品灭菌掌握各类灭菌原理步骤：高压蒸汽灭菌此法是将物品放在密闭的高压蒸汽锅内0.1MPa，121℃保持15～3

6、0min进行灭菌。时间长短可根据灭菌物品和数量的不同而有所不同，以达到彻底灭菌为准。这种方法适用于工作服﹑橡胶物品﹑培养基的灭菌，也可用于玻璃器皿的灭菌。高压蒸汽消毒器高压蒸汽消毒器（干热灭菌）(1)将培养皿、吸管等玻璃器皿洗净干燥后，用报纸包好，或装入特制的铁筒中。(2)将包装好的玻璃仪器摆入电热烘箱中，彼此间留有一定的空隙以便流通空气。(3)关紧箱门，打开排气孔接上电源。(4)待箱内空气排出到一定程度时，关闭上排气孔，继续加热至一定温度后，调节温度控制旋钮固定温度，在160℃～165℃保持2小时即可。(

7、5)待自然降温冷却后(60℃以下)才能开门取出玻璃器皿。鼓风干燥箱