一株生姜青枯病拮抗菌的筛选、鉴定及发酵条件优化.pdf

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1、南方农业学报JournalofSouthernAgriculture2015，46(3)：42l-427ISSN2095—1191；CODENNNXAABhttp：／／www．nfnyxb．CllDOI：10．39690：issn．2095-1191．2015．3．421一株生姜青枯病拮抗菌的筛选、鉴定及发酵条件优化赵志祥L2，严婉荣，，一，陈圆1,27肖彤斌·，一，肖敏1，2+(1海南省农业科学院农业环境与植物保护研究所，海口571100；2海南省植物病虫害防控重点实验室，海口571loo)摘要：【目的】筛选对生姜青枯病菌有较强拮抗

2、活性的细菌菌株，鉴定并优化拮抗菌株的发酵条件，为拮抗菌株的田间应用和活性产物开发提供必要的前期基础。【方法】从生姜青枯病发病较重的田块采集17份健康生姜根际根围土样，采用稀释平板分离和室内活性测定，筛选对生姜青枯病菌有较强拮抗活性的细菌菌株；对拮抗菌株进行形态学、生理生化特性和分子生物学鉴定，并通过改变碳源、氮源、发酵温度、初始pH和发酵时间的长短等外界条件对拮抗菌株进行发酵条件优化。【结果】筛选出1株对生姜青枯病菌有较强拮抗活性的细菌菌株YA．1。结合形态学、生理生化特性和16SrDNA鉴定，确定YA一1菌株为枯草芽孢杆菌(Baci

3、llussubtilis)。结合发酵条件的改变和室内活性测定，确定YA．1菌株的最佳发酵条件为：发酵温度32℃、初始pH7．5、发酵时间48h，最佳培养基配方为NaCl1．0％、CaCO，0．2％、酵母粉0．5％、NI-IA-12PO。0．05％、(NH4)：HPO。0．05％和蛋白胨1．0％。发酵条件优化后，处理48h，抑菌圈平均直径由优化前的23．0innl提高到29．0mm。【结论】YA．1菌株对生姜青枯病菌具有较高的拮抗活性，具有开发成生物农药的潜力。关键词：生姜青枯病；枯草芽孢杆菌；分离鉴定；拮抗作用；发酵条件中图分类号：S

4、476文献标志码：A文章编号：2095—1191(2015)03—0421—07Screening，identificationandfermentationconditionoptimizationofbiocontrolbacteriaYA一1againstgingerbacterialwiltZHAOZhi—xian91”，YANWan—ron91”，CHENYuanl”，XIAOTong-binl”，XIAOMinl’2+(1InstituteofAgro-Environment&PlantProtectionofHainan

5、AcademyofAgriculturalSciences，Haikou571100，China；2HainanKeyLaboratoryforControlofPlantDiseasesandInsectPests，Haikou571100，China)Abstract：【Objective】BiocontrolbacteriaYA-1withstrongantagonismagainstgingerbacterialwiltwasscreenedandthefermentationconditionswereoptimizedto

6、providenecessarypreliminarybasisforstrainapplicationinfieldandproductdevelopment．【Method】Seventeenheahhygingerrhizospheresoilsampleswerecollectedfromfields，whichwereseverelyhitbygingerbacterialwilt．Diluteplateseparationandindoorbioassaywereusedtoscreenactivestrains．Mor-

7、phologieal，physiologicalandbiochemicalcharacteristicsandbacterial16srRNAgenecharacteristicswereanalyzed．Atthesametime，fortheimprovementofinhibitoryeffect，modificationofCsources，Nsources，fermentationtempera·ture，pHvalueandfermentationtimeweremade．【Result】Inthebioassay，tw

8、elvestrainsprovedtopossessantagonisticeffectagainstRalstoniasolanacearum，amongwhichstrainYA一1hadthebestinhibit