一株生姜青枯病拮抗菌的筛选、鉴定及发酵条件优化.pdf

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1、南方农业学报JournalofSouthernAgriculture2015,46(3):42l-427ISSN2095—1191;CODENNNXAABhttp://www.nfnyxb.CllDOI:10.39690:issn.2095-1191.2015.3.421一株生姜青枯病拮抗菌的筛选、鉴定及发酵条件优化赵志祥L2,严婉荣,,一,陈圆1,27肖彤斌·,一,肖敏1,2+(1海南省农业科学院农业环境与植物保护研究所,海口571100;2海南省植物病虫害防控重点实验室,海口571loo)摘要:【目的】筛选对生姜青枯病菌有较强拮抗

2、活性的细菌菌株,鉴定并优化拮抗菌株的发酵条件,为拮抗菌株的田间应用和活性产物开发提供必要的前期基础。【方法】从生姜青枯病发病较重的田块采集17份健康生姜根际根围土样,采用稀释平板分离和室内活性测定,筛选对生姜青枯病菌有较强拮抗活性的细菌菌株;对拮抗菌株进行形态学、生理生化特性和分子生物学鉴定,并通过改变碳源、氮源、发酵温度、初始pH和发酵时间的长短等外界条件对拮抗菌株进行发酵条件优化。【结果】筛选出1株对生姜青枯病菌有较强拮抗活性的细菌菌株YA.1。结合形态学、生理生化特性和16SrDNA鉴定,确定YA一1菌株为枯草芽孢杆菌(Baci

3、llussubtilis)。结合发酵条件的改变和室内活性测定,确定YA.1菌株的最佳发酵条件为:发酵温度32℃、初始pH7.5、发酵时间48h,最佳培养基配方为NaCl1.0%、CaCO,0.2%、酵母粉0.5%、NI-IA-12PO。0.05%、(NH4):HPO。0.05%和蛋白胨1.0%。发酵条件优化后,处理48h,抑菌圈平均直径由优化前的23.0innl提高到29.0mm。【结论】YA.1菌株对生姜青枯病菌具有较高的拮抗活性,具有开发成生物农药的潜力。关键词:生姜青枯病;枯草芽孢杆菌;分离鉴定;拮抗作用;发酵条件中图分类号:S

4、476文献标志码:A文章编号:2095—1191(2015)03—0421—07Screening,identificationandfermentationconditionoptimizationofbiocontrolbacteriaYA一1againstgingerbacterialwiltZHAOZhi—xian91”,YANWan—ron91”,CHENYuanl”,XIAOTong-binl”,XIAOMinl’2+(1InstituteofAgro-Environment&PlantProtectionofHainan

5、AcademyofAgriculturalSciences,Haikou571100,China;2HainanKeyLaboratoryforControlofPlantDiseasesandInsectPests,Haikou571100,China)Abstract:【Objective】BiocontrolbacteriaYA-1withstrongantagonismagainstgingerbacterialwiltwasscreenedandthefermentationconditionswereoptimizedto

6、providenecessarypreliminarybasisforstrainapplicationinfieldandproductdevelopment.【Method】Seventeenheahhygingerrhizospheresoilsampleswerecollectedfromfields,whichwereseverelyhitbygingerbacterialwilt.Diluteplateseparationandindoorbioassaywereusedtoscreenactivestrains.Mor-

7、phologieal,physiologicalandbiochemicalcharacteristicsandbacterial16srRNAgenecharacteristicswereanalyzed.Atthesametime,fortheimprovementofinhibitoryeffect,modificationofCsources,Nsources,fermentationtempera·ture,pHvalueandfermentationtimeweremade.【Result】Inthebioassay,tw

8、elvestrainsprovedtopossessantagonisticeffectagainstRalstoniasolanacearum,amongwhichstrainYA一1hadthebestinhibit

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