秀丽隐杆线虫.doc

《秀丽隐杆线虫.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、分类号编号烟台大学毕业论文利用秀丽隐杆线虫筛选抗白色念珠菌活性物质Screeninganti-CandidaalbicanssubstancesusingCaenorhabditiselegans利用秀丽隐杆线虫筛选抗白色念珠菌活性物质摘要：以秀丽隐杆线虫作为模型生物进行抗菌物质筛选。用白色念珠菌感染线虫后，采用不同浓度的已知抗菌药物治疗，观察线虫存活情况，确定合适用药浓度；采用微拟球藻提取物对白色念珠菌感染线虫治疗，观察线虫存活情况，与已知抗菌药物作用效果对比，从而筛选出可用于治疗白色念珠菌活性物质。实

2、验发现，添加10~20mg/L的氟康唑对感染白色念珠菌的秀丽隐杆线虫治疗效果较好，在一定剂量范围内，治疗效果和剂量成线性关联；微拟球藻提取物不具备抗菌活性。关键词：秀丽隐杆线虫；白色念珠菌；抗菌物质Abstract:Inthestudy,Caenorhabditiseleganswereusedasmodelorganismtoscreenantibacterialagents.C.eleganswereinfectedbyCandidaalbicansandtreatedbydifferentconce

3、ntrationsofantibacterialagentswhichhadbeenknownandextractsfromNannochloropsisOZ-1,observatingthesurvivalsituationandcomparingtheeffectsofthetwoantibacterialagents,thus,thebioactivesubstancecouldbescreenedwhichcuredtheCandidaalbicans.TheresultshowedthatCan

4、didaalbicanscouldbetreatedby10~20mg/LFluconazole,moreoverwithinthescopeofthedose,treatmenteffectandthedoseofalinearcorrelation.AndtheresultsshowedthatextractsfromNannochloropsisOZ-1didnothaveantibacterialactivity.Keywords:C.elegans；Candidaalbicans；Antibac

5、terialsubstances目录1文献综述11.1秀丽隐杆线虫11.2秀丽隐杆线虫研究进展11.2.1环境毒理学的研究21.2.2程序性细胞死亡的研究21.2.3秀丽隐杆线虫感染模型的建立21.2.4抗菌物质作用机制的研究21.2.5病菌致病机制和线虫免疫机制的研究31.3白色念珠菌31.4抗菌物质的筛选41.5实验研究意义52材料和方法62.1材料62.1.1实验药品62.1.2实验仪器62.1.3线虫和菌株72.1.4培养基72.1.5试剂72.2方法72.2.1线虫培养和保存72.2.2线虫同步

6、化82.2.3线虫真菌感染82.2.4线虫抗感染治疗82.2.5观察83实验结果分析93.1氟康唑用药浓度的选择93.2筛选可用于治疗白色念珠菌的微拟球藻提取物94结论12致谢13参考文献141文献综述1.1秀丽隐杆线虫秀丽隐杆线虫[1]（Caenorhabditiselegans）（图1）是一种多细胞真核生物，个体很小，以细菌为食，可独立生存在温度恒定环境中，对人、动植物没有危害。成虫1mm左右，通体透明，在普通显微镜下可观察。秀丽隐杆线虫有很少的雄性个体，大多数为雌雄同体。秀丽隐杆线虫生命周期很短，从

7、卵到成虫需要3.5d，平均寿命约为2~3周[2]。雌雄同体个体产卵孵化后，会经历四个幼虫期（L1-L4），L4期生有精子，并在成虫期产卵。雄性也能使雌雄同体受精，且雌雄同体优先选择雄性的精子。当族群拥挤或食物不足时，秀丽隐杆线虫会进入dauer幼虫期，dauer能对抗逆环境，而且不会老化。秀丽隐杆线虫基因组测序完成，是第一个完成的多细胞动物基因序列测定的动物，它的基因组序列40%以上与人类同源。秀丽隐杆线虫有5对常染色体和1对性染色体，其遗传背景清晰。图1秀丽隐杆线虫Fig.1Caenorhabditis

8、elegans1.2秀丽隐杆线虫研究进展秀丽隐杆线虫最开始被用于研究发育生物学和神经生物学，随科学技术发展，对秀丽隐杆线虫的广泛研究，人们发现了调节器官发育及细胞程序性死亡的关键性的基因，也证明了这些基因同样存在于高等动物中。这些研究开辟了研究人体细胞的分化及演变的道路，有利于研究很多疾病的发病机制。Brenner[1]选取了秀丽隐杆线虫线虫作为生物模型，开启了一个崭新的领域。秀丽隐杆线虫具有结构简单、生命周期短、基因测序完成