青海省2011年麻疹病毒基因型分析.pdf

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1、医学动物防制2012年3月第28卷第3期JMedPestControl,Mar2012,Vo1.28.No.03·239··论著·doi:10.3969/j.issn.1003—6245.2012.03.002青海省2011年麻疹病毒基因型分析范丽霞.一,王素萍,巴卓玛,赵生仓,易虎,姜双应摘要:目的分析西宁市2011年麻疹病毒流行株的基因特征。方法用Vero/slam细胞从发热伴出疹病例的咽拭子标本中分离出麻疹病毒,采用逆转录一聚合酶链反应一限制性片段长度多态性分析(ReverseTranscription—PolymeraseChainReaction—RestrictionFr

2、agmentLengthPolymorphism,RT—PCR—RFLP)方法,检测毒株。结果应用H1基因型麻疹野病毒RT—PCR—RFLP方法,对麻疹毒株进行鉴定,其RT—PCR阳性产物经SalI酶切后被切成2个片段,分别为408个和159个核苷酸,显示该病例由H1基因型麻疹病毒引起。结论2011年分离到的5株麻疹毒株均为Hl基因型麻疹病毒,与中国其它地区的流行情况一致,无新型及传人性的其它亚型出现。关键词:麻疹病毒;限制性片段长度多态性分析;H1基因型中图分类号:RS11.1文献标识码:B文章编号:1003—6245(2012)03—0239—03Analysisongenoty

3、pingofmeaslesvirusinQing~aprovincein201lFANLi—xia,WANGSu—ping,BAZhuo—ma,ZHAOSheng—cang,YIHu,JIANGShuang—ying.ShanxiMedicalUniversity,Shanxi030001,China.Abstract:ObjectiveToinvestigatethegeneticcharacteristicsofmeaslesvirusinXiningCityin2011.MethodA-doptingVero/SLAMcelltoisolatemeaslesvirusfromt

4、hroatswabspecimensoffeverwitheruption,anddetectedbyReverseTranscription—PolymeraseChainReaction—RestrictionFragmentLengthPolymorphismmethod(R_T—PCR—RFLP).ResultsMeaslesvirusstrainwasidentifiedbyH1genoty~ofwildmeaslesvirusofRT—PCR—RFLPmethod.Therewere2nucleotidefragmentswhenRT—PCRpositiveproduct

5、senzyme—cutbySalI.including408and159nucleotiderespec—tively.whichindicatetIlecasescausedbyHlgenotypeofmeaslesvirus.ConclmiomIn2011.5measlesvirusstrainswereisolated,andallwereH1genotypeofmeaslesvirus,whichaccordwiththeepidemicstatusofotherareasinChina,nonewtypeandotherforeignsubtypeappearedin201

6、1.Keywords:Measlesvirus,RT—PCR—RFLP,H1genotype麻疹是由麻疹病毒引起的急性发热出疹性呼吸道传染病,液,每天观察细胞液pH值和细胞病变(CPE),75%一90%麻疹病毒只有一个血清型,但有多个基因型,目前已发现麻疹CPE时收冻。Veto/SLAM细胞由国家麻疹实验室提供。病毒的23个基因型曾在或正在人类中循环⋯,世界卫生组织1.3核酸提取(WHO)已将麻疹列为继全球消灭天花和即将消灭脊髓灰质炎采用QIAGEN公司的RNA提取试剂盒,按说明书步骤进之后下一个拟被消除的传染病。2005年我国所在的WHO西太行。提取后的总RNA于一7O冷冻保存备用

7、。平洋区(WPRO)承诺于2012年消除麻疹。为摸清2011年我1.4麻疹病毒鉴定省流行的麻疹病毒的基因型,借助国家科技重大传染病监测技应用RT—PCR方法对麻疹病毒进行鉴定,PCR反应体系术平台项目,现对2011年1~8月青海省妇女儿童医院和青海使用QIAGENOneStepRT—PCRKit(Catalog#210212);RNA省红十字医院的儿科门诊及住院15岁以下发热伴出疹70例患酶抑制剂:10u/~L,为Promega生产;引物:上海生工合成,儿

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