环境检测标准作业指导书.doc

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1、1.目的：检测生产车间空气•操作人员手部•与食品有直接接触面的机械设备的微生物指标，达到规定标准,以控制食品成品的质量；2.参照标准：中华人民共和国国家标准《一次性使用卫生用品卫生标准》GB15979—1995、《HACCP原理与实施》、中华人民共和国国家标准《公共场所空气微生物检验方法细菌总数测定》GB/T18204.1-20003.采样与检测方法：4.空气的采样与测试方法4.1样品采集：在动态下进行，室内面积不超过30m2,在对角线上设里、中、夕卜三点，里、外点位置距墙1in；室内面积超过30m2,设东、西、南、北、中五点，周围4点距墙1采样时，将含

2、营养琼脂培养基的平板（直径9cm）置采样点（约桌面高度），并避开空调•门窗等空气流通处，打开平皿盖，使平板在空气中暴露5min。采样后必须尽快对样品进行相应指标的检测，送检时间不得超过6h,若样品保存于0〜4°C条件时，送检时间不得超过24h。4.2细菌•霉菌培养：4.2.1在采样前将准备好的营养琼脂培养基置36°C±1°C培养24h,孟加拉红培养基置27±2°C培养48h,取出检查有无污染，将污染培养基剔除。4.2.2将己采集样品的培养基在6h内送实验室，细菌于36°C±1°C培养48h,霉菌27±2笆培养3天，2天观察。4.2.3观察结果，计数平板上

3、细菌菌落数。4.3菌落计算：4.3.1记录平均菌落数,用“个/皿”来报告结果。用肉眼直接计数，标记或在菌落计数器上点计，然后用5〜10倍放大镜检杏，不可遗漏。4.3.2若培养皿上有2个或2个以上的菌落重叠，可分辨时仍以2个或2个以上菌落计数。5.工作台（机械器具）表面与工人手表面采样与测试方法:5.1样品采集：工作台（机械器具）：用一浸有灭菌生理盐水的棉签在被检物体表面（取与食品直接接触或有一定影响的表面）取5cmX5cm的面积，在其内涂抹10次，然后剪去手接触部分棉棒，将棉签放入含10mL灭菌生理盐水的采样管内送检。工人手：被检人五指并拢,用一浸湿生理

4、盐水的棉签在右手指曲面，从指尖到指端来问涂擦10次,然后剪去手接触部分棉棒，将棉签放入含10mL灭菌生理盐水的采样管内送检。4.2细菌-霉菌-大肠菌群的检测培养：5.2.1将放有棉棒的试管充分振摇。此液为1：10稀释液。如污染严重，可十倍递增稀释，即吸取1ml1：10样液加9ml无菌生理盐水中，混匀，此液为1：100稀释液。；5.2.2细菌：3以无菌操作，将两个稀释度样液（1：10、1：100）分别注入到无菌平皿内，每个稀释度做两块平J11L（平行样），每11111ml；H将已融化冷至45°C左右的营养琼脂培养基倾入平IIIL,每皿约15ml,置36°C

5、±1°C培养48h；5.2.3霉菌：可同上U将己融化冷至45C左右的营养琼脂培养基倾入平皿，每皿约15ml,置27±2°C培养3天，2天；5.2.4大肠菌群：3以无菌操作，将两个稀释度样液（1：10、1：100）分别注入到乳糖肌盐发酵管内，每个稀释度3管，每管1ml；H置36°C±1°C培养24h；1.3菌落计数与方法作平JIIL菌落（包括细菌•霉菌）计数时，可用肉眼直接观察，必要时用放大镜检查以防遗漏，在记下各平皿的菌落数后，求出同一稀释度笞平皿生长的平均菌落数。若平川1.中有连成片状的菌落；该平皿不宜计数;若片状菌占平皿中的一半，而其余一半中菌落分布

6、均匀，则可将此半个平皿菌落计数后乘2,以代表全皿菌落数。5.3.1菌落计数的报告：□选择平均菌落数在30-300Z间的稀释度，乘以稀释倍数报告（见表1中例1）。回若有两个稀释度，其平均菌落数均在30〜300之间，则应求出两个稀释度菌落总数之比值来决定，若其比值小于或等于2,应报告其平均数，若大于2则报告其中稀释度较低的平Jill.菌落数（见表1中例2、例3）。□若所有稀释度的平均菌落数均大于300,则应按稀释放度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之（见表1中例4）。m若所有稀释度的平均菌落数小于30,则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之（见表1中

7、例5）。国若所有稀释放度的平均菌落数均不在30〜300之间，其中一个稀释度平均菌落数大于300,而相邻的另一个稀释度平均菌落数小于30,则以接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告之（见表1中例7L⑥若所有的稀释度均无菌生长，报告数为小于1乘以稀释倍数报告之（见表1中例6）。0菌落计数的报告，菌落数在10以内时，按实有数值报告之，大于100时，采用二位有效数字，在二位有效数字后面的数值，应以四舍一五入法计算。为了缩短数字后面零的个数。可用10的指数来表示（见表1中报告方式栏）。在报告菌落数为“不可计”时，应注明样品的稀释度。表1细菌计数结果及报告方式

8、例次不同稀释度菌落平均数两稀释度菌数之比1蜀落总数CFU/10cm2报告方式CF