电泳技术在药物分析中的应用.doc

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1、电泳技术在药物分析中的应用摘要:本文概括的讲述了电泳技术产生的历史及发展历程,简要介绍了几种常见的电泳技术的原理,特点,及其在药物分析中的应用。其中重点讲述了毛细管电泳法在该领域的应用,及其发展前景关键词:电泳技术药物分析毛细管电泳法电泳(electrophoresis,EP)是指带电颗粒在电场作用下,向肴与其电性相反的电极移动的现象,而电泳技术则是利用带电粒子在电场中移动速度不同而达到分离的技术。早在1807年由俄国莫斯科大学的斐辿南•弗雷德里克•罗伊斯(FerdinandFredericReuss)发现1

2、937年诺贝尔奖获得者,瑞典化学家AmeTiselius教授利用电泳现象发明了最早期的界血电泳,用于蛋白质分离的研究,从而开创了电泳技术的新篇章。此后,芥种电泳技术及仪器相继问世,先进的电泳仪和电泳技术的不断发展,使它在生物化学实验技术中占重要地位,按电泳的原理有三种形式的电泳分离系统:原则上按电泳的原理来分,即移动界面电泳(movingboundaryelectrophoresis)a区带电泳(zoneelectrophoresis)和稳态电泳(steadystateelectrophoresis)或称置换

3、(排代)电泳(displacementelectrophoresis).中国药典1990年第二部首次将电泳法作为法定的,通用的检测方法收载入附录中,1995年版,2000年版将电泳中的五•中电泳技术(纸电泳法,醋酸纤维素薄膜电泳法,琼脂糖凝胶电泳法,聚丙烯酰敏凝胶电泳法,SDS-聚丙烯酰敏凝胶电泳法)在附录中规定下-来,并对高效毛细管电泳法也做了详细的说明。现将以上电泳技术作简要说明:一,纸电泳法纸电泳的设备简单,应用广泛,是最早使用的一种电泳技术。最初用于蛋白质,后来也用于氛基酸、核昔酸一些低分了物质,其优

4、点在于或采用滤纸与色素结合的直接电泳图,或剪下滤纸的任何部分来抽提其中的物质。在早期的生物化学研究中,曾发挥重要作用。由于纸电泳时间长,分辨率较差,近年来逐渐为其他快速、筒便、分辨率高的电泳技术所代替。在1998年生化药品第一分朋中仅有三磷酸腺昔二钠,三磷酸腺昔二钠注射液的含量的测定,及与胞磷胆碱钠有关的物质采用此方法,此外,在植物化学成份的分离中也可以得到应用二,醋酸纤维素薄膜电泳法酷酸纤维薄膜电泳是与纸电泳法在同一时期发展起来的,因其操作简单、快速、廉价,所以现在多用其来纸电泳法。它已经广泛用于血清蛋白,

5、血红蛋白,球蛋白,脂蛋门,糖蛋白,甲胎蛋白,类固醇激素及同工蟾等的分离分析中,尽管它的分辨力比聚丙酰胺凝胶电泳低,但它具有简单,快速,灵敏度高,应用面广等优点。在中国药典2000年二部中,记载了其应用于人乙型肝炎免疫球蛋白,人狂犬病免疫球蛋白等蛋白质类的鉴别与测定三,琼脂糖凝胶电泳法琼脂糖凝胶电泳是用琼脂或琼脂糖作支持介质的一种电泳方法。对于分了量较大的样品,如大分了核酸、病毒等,一般可采用孔径较大的琼脂糖凝胶进行电泳分离。其分析原理与其他支持物电泳最主要区别是:它兼有“分子筛”和“电泳”的双重作用。其可被应

6、用于螺旋藻多糖的鉴别,乳酸脱氢酶同工酶的测定,及血红蛋白的检测等项目四,聚丙烯酰氨凝胶电泳法及SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳法聚丙烯酰宾凝胶电泳法是20世纪60年代发展起来的一种电泳技术,主要用于分离蛋白质和寡核荷酸。聚丙烯酰胺凝胶为网状结构,具石•分子筛效应。它右•两种形式:非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)及SDS-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE);非变性聚丙烯酰胺凝胶,在电泳的过程中,蛋白质能够保持完整状态,并依据蛋白质的分子量大小、蛋白质的形状及其所附带的电荷量而逐渐呈梯度分开。而SDS

7、-PAGE仅根据蛋门质亚基分了量的不同就可以分开蛋白质。该方法应用广泛,可进行与胰岛素及中性胰岛素注射液有关的蛋白质检杏,血浆脂蛋白含量的测定,及胸腺肽的相对分了质量的测定等五,高效毛细管电泳法毛细管电泳(capillaryelectrophoresis,CE)又称高效毛细管电泳(highperformancecapillaryelectrophoresis,HPCE),是一类以毛细管为分离通道、以高压有流电场为驱动力的新型液相分离技术。它的最大的优点之一是应用范围广,可以分离多神化合物。目前,CE分析技术被

8、药物分析丁.作者在药品检验领域迅速推广应用。药物分析大致可以分为两部分:一、原药的定量、原药中杂质的测定、药剂分析以及对它们稳定性的评价等以药品质量管理为目的的测定方法。二、对进入人体内的药物或代谢物的吸收、分布、代谢、排泄等体内动态的研究,即临床药物分析。这两部分的测定一般需要分离和检测手段相结合。如今,电泳技术发展的越来越快,电泳技术的研究和应用,也给药物分析领域和药品检验工作带来了生机与活力,

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