hMLHl、hMSH2及PCNA在宫颈癌组织中的表达及意义.doc

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1、hMLHLhMSH2及PCNA在宫颈癌组织中的表达及意义［摘要］目的：探讨宫颈癌中错配修复基因hMLHKhMSH2及PCNA蛋白表达的关系及意义。方法：采用免疫组织化学SP法检测68例宫颈癌中的bMLHkhMSH2及PCNA蛋白表达。结果:①宫颈癌中,hMLHLhMSH2及PCNA蛋白阳性表达率为57.35%、58.82%及72.06%。②在PCNA阳性表达和阴性表达的宫颈癌病例中，hMLHl阳性表达率分别为61.22%和47.37%,hMSI-12阳性表达率分别为67.35%和36.84%。PCNA与

2、hMSH2表达呈正相关(P<0.05)o结论：hMSH2可能通过与PCNA蛋白相互作用参与宫颈癌的发生。［关键词］宫颈癌；hMLH1；hMSH2；PCNA；免疫组织化学［中图分类号］R737.3［文献标识码］A［文章编1674-4721(2009］05(b)-011-02宫颈癌是女性生殖系统常见的恶性肿瘤，其发病机制目前仍不清楚。研究表明，由于体内外各种因素的刺激造成的DNA损伤是其发展的重要原因。人体细胞存在DNA错配修复(DNAmismatchrepair,MMR)系统，错配修夏功能的完整是细胞DN

3、A准确夏制和基因组稳定的基木保证。该功能缺失与多种恶性肿瘤的发生、发展密切相关，但其在子宫颈癌发生中的作用尚不清楚。hMLHl和hMSII2是错配修复系统的2个重要成员。增殖细胞核抗原(proliferatingcellnuclearantigenoPCNA)与细胞DNA合成密切相关。木研究通过免疫组织化学法检测68例宫颈癌的hMLHl、hMSH2及PCNA蛋白表达，探讨宫颈癌中PCNA表达与hMLHl、hMSH2表达的关系及意义。1资料与方法1.1一般资料选取大连妇产医院2000〜2002年收治的68

4、例宫颈癌手术病例。患者年龄为22〜78岁，中位年龄40岁。所有标本均经4%中性甲醛固定，石蜡包埋，制成3〜5切片，HE染色，由两位有经验的病理医师进行病理学诊断。1.2试剂与方法采用免疫组织化学SP法染色，切片常规脱蜡水化，微波加热抗原修夏，鼠抗人单克隆抗体hMLHl(1:50稀释,美国ZymedLaboratories公司，克隆系：14)、鼠抗人单克隆抗hhMSH2(1:250稀释，美国ZymedLaboratories公司，克隆系：FE11)、PCNA(1:400,克隆系：pc10,美国NeoMar

5、ker公司)40cC孵育过夜，操作按SP试剂盒(北京中山生物技术有限公司)说明书进行。以PBS代替一抗作为阴性对照。选取己知阳性的切片作为阳性对照。1.3结果判定hMLHl、hMSII2以细胞核或细胞浆内出现棕黄色颗粒的细胞为阳性细胞，PCNA以核内出现棕黄色颗粒细胞为阳性细胞，计数5个高倍视野或500个细胞。对hMLHLhMSH2判定：阳性细胞数与实质细胞总数之比310%,判为阳性表达，否则为阴性表达。PCNA判定：阳性细胞数与实质细胞总数之比>20%为阳性表达，否则为阴性表达。结果均由两位有经验的病

6、理医师采用双盲法判定。1.4统计学方法采用)(2检验，应用SPSS13.0软件对结果进行统计学分析。PV0.05为差异有统计学意义。2结果2.1hMLHl、hMSH2及PCNA蛋白在宫颈癌中的表达在宫颈癌中，hMLHLhMSH2及PCNA蛋白阳性表达率分别为57.35%(39/68)、58.82%(40/68)及72.06%(49/68)，见图1、2。2.2PCNA与hMLHLhMSH2蛋白在宫颈癌中的表达关系在PCNA阳性表达与阴性表达的宫颈癌病例中,hMLHl阳性表达率分别为61.22%和47.37

7、%,hMSH2阳性表达率分别为67.35%和36.84%。PCNA阳性表达病例中,hMLHl、hMSH2表达率均较高，但PCNA表达与hMLHl表达无显著相关关系(P>0.05)。PCNA与hMSII2表达显著相关(PV0.05)。见表1。3讨论MMR基因是高度保守的看家基因，其功能完整保证了DM复制的高保真性。突变或启动了甲基化能够通过减少或抑制该类基因表达，使机体错配修复功能缺失，从而引起整个基因组的不稳定以至肿瘤发生。hMLHKhMSH2是MMR系统的重要成员，其编码蛋白的主要功能是识别DNA错配

8、并结合错配碱基，启动修夏反应。许多恶性肿瘤的发生伴随着错配修夏蛋白结构或功能的异常，常表现为hMLHl、hMSH2蛋白表达的减少或增多。如大肠癌，常出现因错配修复基因突变或甲基化引起的蛋白表达减少。但有些恶性肿瘤，却常出现hMLHl、hMSII2蛋白表达增多。本研究宫颈癌组织中,hMLHl、hMSH2蛋白阳性表达率为57.35%、58.82%,也有较高表达。有学者认为增殖细胞核抗原在宫颈癌组织中其阳性率显著增高，肿瘤细胞过度增殖时会伴有DN