水稻纹枯病拮抗细菌的筛选·鉴定及其活性成分的发酵制备.pdf

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1、安徽农业科学，JournalofAnhuiAgn．Sci．2014，42(25)：8584—8586，8647责任编辑乔利利责任校对李岩水稻纹枯病拮抗细菌的筛选·鉴定及其活性成分的发酵制备黄河，鄢凯舟，林元山，丰来，罗志威(1．湖南农业大学东方科技学院，湖南长沙410128；2．湖南泰谷生物科技股份有限公司，湖南长沙410205)摘要[目的]探究水稻纹枯病拮抗细茵的抑茵活性成分的发酵制备条件。[方法]通过点接种于平板与水稻纹枯病对峙生长对水稻纹枯病拮抗细菌进行了初筛，通过摇瓶发酵进行了复筛，并通过形态鉴定及16SRNA测序构建系统发育树对所得菌株进行鉴定；通过单

2、因素试验研究了所得菌株的抑茵活性成分的发酵制备条件。[结果]初筛获得17株水稻纹枯病的拮抗细菌，复筛获得菌株Lys-67，该茵株的发酵液对水稻纹枯病生长具有明显的抑制作用，菌株Lys-67鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillussubtil~)。经单因素试验，菌株Lys-67利用麸皮5．0％，于35℃、摇床转速200r／min条件下发酵3d，经牛津杯打孔法检测，150txl发酵液中活性成分抑制水稻纹枯病的抑菌圈达36mm。I结论l为茵株Lys-67的进一步研究及生防应用奠定了基础。关键词水稻纹枯病；拮抗茵；筛选；发酵；生物防治中图分类号Q93．3；$435．1l1．

3、42文献标识码A文章编号0517—6611(2014)25—08584—03Screening，IdentificationofAntagonisticBacteriaagainstRhizoctoniasolaniandPreparationofItsActiveIngredientbyFermentationHUANGHe，LINYuan-shalletal(Ofien~lScienceandTechnologyCollegeofHunanAgriculturalUniversity，Changsha，Hunan410128)Abstract[Objecti

4、ve]TheaimwastostudythefermentationconditionsofantagonisticbacteriaactiveingredientagainstRhizoctoniasolani．[Method]SomeantagonisticbacteriaagainstR．solaniwerescreenedthroughpointinoculatingcontrarytoR．solanionagarpetriplatesandshakingflaskfermentation；theobtainedstrainwasidentifiedth

5、roughmorphologicalidentificationand16SRNAsequencingtoconstructphylo—genetictree；andfermentationconditionsofactiveingredientoftheobtainedstrainagainstR．solaniwerestudiedthroughsinglefactorexperi—ment．[Result]SeventeenstrainsofbacteriaantagonistR．solaniwereobtained，andstrainLys-67wasob

6、tainedfinally；strainLys-67wasi—dentifiedasBacillussubtil~．Also，150lfermentationbrothofstrainLys-67resultedin36mmofinhibitionzoneagainstR．solani，determi—ningbymethodofdrillingholewithOxfordcuponagarplate，whilestrainLys·67wasculturedinwheatbran5．0％，at35℃，rotationspeed200r／minforthreeda

7、ys．[Conclusion]TheresultslaybasisforfurtherstudyandapplicationofstrainLys-67．KeywordsRhizoctoniasolani；Antagonisticbacteria；Screening；Fermentation；Biologicalcontro1水稻纹枯病是我国水稻种植区重要病害，严重时会导致1．1．2供试病原真菌。水稻纹枯病菌由湖南农业大学生物我国水稻产量年损失在10％以上。目前，在生产上主要用科学技术学院保存。将该菌株接种于WBA中28培养，待3％井冈霉素水剂来防治水稻纹枯病，

8、赖开平等研究表明菌丝长满