金银花水提物和超微饮片抗菌作用比较研究.pdf

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1、中医研究2014年第5期金银花水提物和超微饮片抗菌作用比较研究曾碧映L，李冉冉，邓凤君。，李新才，陈畅乾，刘俊杰，曾嵘(1．湖南中医药大学，湖南长沙410208；2．益阳医学高等专科学校，湖南益阳413000)【摘要】目的根据目前临床金银花传统饮片和超微饮片所用的剂量，比较金银花水提物和金银花超微饮片的抑菌作用，为临床应用提供依据。方法采用平皿法测定抑茵圈、二倍稀释法测定最低抑茵浓度(MIC)。蛄果金银花水提物和超微饮片对金葡茵的MIC分别为6．25mg／mL、3．12mg／mL，对大肠杆菌、绿脓杆菌、伤寒杆茵MIC均为12．50mg／mL，对枯草杆茵MIC分别为25．00mg

2、／mL、12．50mg／mL。金银花水提物和超微饮片舍药血清对大肠杆菌、绿脓杆菌、伤寒杆菌的MIC均为0．50ug／mL，对枯草杆菌的MIC均为1．O0ug／mL，对金葡菌的MIC分别为0．13ug／mL、O．06ug／mL。结论金银花水提物和超微饮片体外具有抑茵作用，且二种饮片给药后的家兔含药血清也均具有抑菌作用。金银花超微饮片为金银花传统饮片的1／6剂量时，具有相近抑菌效果。【关键词】金银花水提物；金银花超微饮片；最低抑菌浓度；实验研究【中图分类号】R28【文献标识码】A【文章编号】1007—4244(2014)05—053—2金银花为忍冬科植物忍冬的干燥花蕾或带初开的花，

3、研究报道性，3000rpm／min离心30min，取上清液，获得含药血清供试品，待具有良好的抗菌活性。中药超微饮片作为一种新型饮片，具有节省用，在一20℃冷冻保存。药材、质量可控、卫生方便、配伍灵活、免煎高效等特点，在临床广泛1．2．4肉汤培养基的制备应用。目前，临床金银花超微饮片用量为1．6g，相当于金银花传统饮蛋白胨10．0g／L，牛肉浸膏5．0L，氯化钠5．0g／L，琼脂8．0g／L，片用量lOg，两者是否等效?我们拟通过实验研究找出依据。PH：7．2，121℃灭菌20min。本实验对金银花水提物和超微饮片的抑菌作用进行比较研1_2．5种菌液的制备究，结果如下。取金黄色葡

4、萄球菌、大肠埃希菌、绿脓杆菌、伤寒杆菌、枯草1材料与方法杆菌5个菌株，分别在肉汤培养基37℃下培养约48h后，经振荡、1．1材料搅匀，作为种菌液备用。将5种菌种用适宜的斜面活化，以无菌生1．1．1药材：金银花饮片药材(河北毫州市沪滇药业有限公司，批理盐水制成含菌数约为105CFU，mL。号：1204030042，购于湖南中医附一门诊药房)；金银花超微饮片1．2．6抑菌实验方法(湖南春光九汇现代中药有限公司，批号：120112，购于湖南中医抑菌活性实验：采用滤纸片法，取直径6mm滤纸片置于真空附一门诊药房)；干燥箱中灭菌干燥，分别放入前面配制的两种样品溶液中浸泡1．1．2菌株：金

5、黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、绿脓杆菌、伤寒杆菌、4h，取出晾干。取各种供试菌悬液各0．2mL，分别注入无菌培养皿，枯草杆菌均为益阳市中心医院临床分离株，所有菌株均经再倒人15mL琼脂培养基，混匀后冷却成含菌平板，随后取浸泡过VITEK2全自动系统鉴定(法国生物梅里埃公司)。质控菌株为金药液的滤纸片，贴在含菌平板上，每皿贴4片，细菌放于36培养黄色葡萄球菌ATCC25923、大肠埃希菌ATCC25922，绿脓杆菌箱中24h。ATCC9027、伤寒杆菌CMCC50071、枯草杆菌ATCC6633。1．2．7最低抑菌浓度(MIC)的测定1．1．3实验动物：雄性家兔8只，体质量1．5-2

6、Kg，由湖南中医药用肉汤培养基采用试管二倍稀释法稀释为一系列对倍稀释大学实验动物中心提供(合格证号：SCXK(湘)2009—0012)。实验动液，其浓度分别为：(1)两种饮片抑菌试验：两种饮片各8管，浓度物分为金银花水提液组和金银花超微饮片组。梯度如下：50．00、25．00、12．50、6．25、3．12、1．56、0．78、0．39mg／mL；1．1．4仪器：Hfsafe一1200生物安全柜(上海力康)；电热恒温培养(2)两种饮片含药血清抑菌试验：两种饮片含药血清浓度各8管，箱(上海和呈)；AL一204电子天平(日本梅特勒公司)；Vibrax振荡浓度梯度分别为：2．o0、1

7、．00、0．50、0．25、0．13、0．06和0．03ug／mL，将器(德国IKA仪科)。它们分装于试管中并加入种菌液0．05mL，在37℃下培养约48h。1．2方法以肉眼看不见细菌生长的最低一管药物浓度为对该菌种的MIC。1．2．1剂量换算1．3统计学处理临床人用金银花药材为10g／天，临床人用金银花超微饮片为实验数据均以x±s表示，采用SPsS16．0统计软件进行分析。1．6rd天，均取临床用量的16倍，按照家兔与人的体表面积折算，组间计量资料比较用t检验，P