芦丁对HepG2肝癌细胞AMPK蛋白信号通路的激活作用.pdf

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1、·180·JoumalofMedicalScienceYanbianUniversitySep．2013Vo1．36No．3salidrosideagainstacetaminophen—inducedtoxicityinmiceEJ2．BiolPharmBull，2008，31(8)：1523．1529．囹芦丁对HepG2肝癌细胞AMPK蛋白信号通路的激活作用元海丹，李海燕，王瑜玲，朴光春(1．延边大学药学院生药学教研部，吉林延吉133002；2．牡丹江医学院红旗医院，黑龙江牡丹江157011)[摘要][目的]探讨芦丁在HepG2

2、细胞中是否影响AMPK蛋白信号通路．[方法]采用MTS法测定细胞毒性；采用Westernblot方法检测AMPK蛋白的表达情况．[结果]芦丁在0-80“mol／L浓度范围内，在24h内对HepG2肝癌细胞没有毒性；芦丁呈浓度和时问依赖性地增高AMPK磷酸化．[结论]芦丁对HepG2肝癌细胞AMPK蛋白信号通路有激活怍用．[关键词]HepG2细胞；芦丁；AMPK[中图分类号]R285．5[文献标志码]A[文章编号]1000—1824(2013)03—0180—02Effectsofrutin0nactivation0fAMPKsign

3、alpathinHepG2cellsYUANHai—dan，LIHai—yan。WANGYu—ling，PIAOGuang—chun(1．DepartmentD『Pharmacognosy，YanbJanUniversityCollegeofPharmacy，Yanji133002，Jilin，China；2．HongqHospitalofMudanjiangMedicalCollege，Mudanoiang157011，Heilongjiang，China)ABSTRACT：0BJECTIVET0studytheeffectsof

4、rutbtonactivationofAMPKsignalpathinHepG2humanhepatomacells．METHODSThetoxicityofturinforHepG2cellswasdeterminedbyMTS，andtheexpressionofAMPKproteinwasdeterminedbyWesternblot．RESULTSRutininconcentrationrangeof0to80>mol／LhadnoanycytotoxicityforHepG2cells，andrutinenhancedAM

5、PKphosphorylati0nindose—andtime—dependentmanners．∞』、rCLjoJlvRutincanincreasetheactivationofAMPKsignalpathinHepG2humanhepatomacells．Keywords：HepG2cells；Rutin；AMPK单磷酸腺苷活化蛋白激酶(adenosine5．mono—HMG—CoA还原酶(HMG—CoAreductase，HMGCR)、phosphate—activatedproteinkinase，AMPK)是调控糖原磷酸

6、酰基转移酶、糖原合成酶及RNA聚合酶能量稳态的重要激酶，也是参与许多细胞信号传导I转录因子等【划．芦丁的别名为芸香苷、维生素P、通路的关键蛋白．作为细胞的能量感受器，AMPK芸香叶苷及络通等，是黄酮醇类化合物，广泛存在于通过感知细胞内单磷酸腺苷(adenosine5『_芸香叶、枣、杏、橙皮、番茄及荞麦花等植物中．研monophosphate，AMP)：ATP比值的变化来调控线究结果表明，芦丁具有抗炎、抗病毒、抗辐射及抗粒体的功能，从而维持能量稳态．当AMP：ATP的自由基等多种药理作用．本实验采用MTS及比值升高时，AMPK被激活，

7、增强线粒体的生物合Westernblot方法观察了芦丁在HepG2肝癌细胞成，并通过磷酸化多个代谢酶的方式抑制对细胞生AMPK蛋白信号通路的影响．长和增殖极其重要的脂肪酸合成、类异戊二烯合成、1材料与方法三酰甘油及磷脂合成、糖原合成等．这些代谢酶包括乙酰辅酶A羧化酶(acetyl—CoAcarboxylase，ACC)、1．1材料人HepG2肝癌细胞购自美国培养物保存中心(ATCC，77400，USA)，DMEM培养基和胎牛血清购于GIBCO公司，MTS试剂购于PR0MEGA[基金项目]吉林省中医药管理局项目，项目编号：2012．公

8、司，AMPK，p-AMPK，ACC，P—ACC，J3一actin一抗购156．于CellSignalingTechnology(USA)公司，抗兔二抗[收稿日期]2013—07—15购于SantaCruz公司．[作者简介]元海丹(19