小鼠眼球标本石蜡切片制作方法的改进.pdf

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1、36JournalofHenanUniversity(MedicalScience)Mar．2015Vo1．34No．1小鼠眼球标本石蜡切片制作方法的改进孙自强，王军，陈明亮，程会军，张磊，李慧，吉爱玲，李彦章(河南大学医学院，河南开封475004)摘要：目的探讨小鼠眼球标本石蜡切片的制作方法。方法处死C57BL／6小鼠，取眼球固定于质量分数为4中性多聚甲醛中，通过严格控制脱水与浸蜡程序并制成石蜡切片，经HE染色后在显微镜下观察。结果眼球外形均无明显变形和收缩；显微镜下视网膜组织结构完整清晰，各层细胞

2、排列紧密，无明显裂隙。结论该方法适合小鼠眼球标本切片，尤其是视网膜切片的一种有效制作方法。关键词：小鼠；眼球；固定液；HE染色中图分类号：R322．91文献标识码：A文章编号：1672—7606(2015)010036—04ImprovedmethodforparaffinsectionsofmouseeyeballSUNZiqiang，WANGJun，CHENMingliang，CHENGHuijun，ZHANGLei，LIHui，JIAiling，LIYanzhang(Medicalcollege

3、ofHenanUniversity，Kaireng，Henan475004，China)Abstract：0bjectiveTodetermineoptimalHEstainingproceduresonparaffinsectionsofmiceeyebal1．MethodsTheC57BL／6micewerekilledbyusingCO2．Theeyeballsofthemiceweretakenandimmersedinto4neutralparaformaldehyde(PFA)soluti

4、on．Thefixedeyeballsweredehydratedandembeddedinparaffin．TheeyebaIlswerecutto5umthicknesssections．AfterHEstaining，thesectionswereobservedunderalightmicroscope．ResultsTherewasnoobviouseyebal1distortionorretina1detachment．ThestructureofretinaItheeyeballswas

5、clearandintact．Thecellsinretinalwerearrangedregularlyandcompactly．ConclusionTheimprovedmethodforparaffinsectionsiSmoreeffectivethanothersandfittODaraffinsectionsofmouseeyebal1．Keywords：mouse；eyeball；fixativesolution；HEStaining眼球是一个构造精细复杂的球形体，眼球内各种各层组织由于

6、收缩率的不同，采用常规脱水和透明的组织软硬度相差悬殊。巩膜为致密结缔组织，视网膜方法容易使视网膜严重收缩而脱离，严重影响切片的柔软容易脱落，晶体很坚硬，玻璃体为胶状物。由于完整性，对组织学观察造成影响，进而对眼科病理学各部分的结构微细，各层次之间连接性很差，故在制研究造成很大影响。目前，国内外已有制作全眼球病作石蜡切片时较一般组织困难l_l。]：①固定液很难渗理切片的特殊方法，但仍存在制片周期长、材料要求透到组织各层，尤其是不易渗人质地坚韧的巩膜，造特殊、购置困难、成本高以及部分方法所用试剂毒性成眼球

7、内各结构分离的现象；②眼球标本不像其他组较大等缺点，不能适应实际需要l_7]。为克服现有方织标本新鲜时可切开固定，需要整个眼球固定引；③法的不足，我们在常规方法基础上进行技术改进，获收稿日期：2014121O基金项目：国家自然科学基金(31300884)；河南省科技厅科技发展计划项目(132300410012)；河南省教育厅科学技术研究重点项目(14A310020，14A310021)；河南大学科研基金项目(0000A58152，0000A58214，0000A40566)；河南大学研究生科研创新(Y

8、1326081)。作者简介：孙自强(1988一)，男，河南许昌人，在读硕士研究生，从事视网膜损伤修复机制的研究工作。*通讯作者：李彦章(1965一)，男，河南淅川人，博士，教授，从事肥胖和糖尿病及其并发症的教学及研究工作。河南大学学报(医学版)2015年3月第34卷第1期得了满意的结果。2．3浸蜡与包埋透明后的组织在软蜡(二甲苯和石蜡按1：1混1材料和方法合，56～58℃)中浸3Omin一蜡I(56～58℃)浸1h1．1仪器设备和主要试剂一蜡II(58～