高血压对大鼠胰岛微血管密度及胰岛功能的影响-论文.pdf

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1、广东医学2014年4月第35卷第8期GuangdongMedicalJournalApr．2014，Vo1．35，No．8·1l57·高血压对大鼠胰岛微血管密度及胰岛功能的影响米葛龙菲，张继佳，霍灵恩，张景益，马梦瑾，田晨光郑州大学第二附属医院内分泌科，干部病房(郑州450014)【摘要】目的探讨高血压对大鼠胰岛微血管以及胰岛功能的影响，从而为糖尿病的发病原因以及治疗探索新思路。方法12周及24周SPF级SHR大鼠、Wistar大鼠各10只，分为4组(每组1O只)。各组大鼠均行静脉糖耐量试验及静脉胰岛

2、素释放试验，并取胰腺组织行HE染色、免疫组织化学染色观察胰岛形态、微血管密度，并计算相对胰岛素含量。结果静脉糖耐量试验5、10、30min，同周龄组SHR大鼠的血糖均高于Wistar大鼠，SHR大鼠胰岛素分泌高峰延迟，10min开始，Wistar大鼠胰岛素分泌量下降较同周龄组SHR大鼠快，差异有统计学意义(P<0．05)。HE染色，Wistar大鼠胰岛结构清晰，形态无异常，SHR大鼠胰岛增大伴内部出血。微血管密度方面。同周龄组SHR大鼠阳性区域光密度明显高于Wistar大鼠，差异有统计学意义(P<0．

3、05)。结论高血压导致胰岛微血管密度下降，并影响胰岛功能，尤其影响胰岛素第一时相的分泌，其可能与微循环障碍导致的胰岛素释放功能障碍相关。【关键词】高血压；胰岛微血管密度；胰岛功能一直以来关于糖尿病合并高血压发病机制的研究照周龄不同各分为12周龄组和24周龄组两组，12周未曾中断，比较公认的机制有以下几种：胰岛素抵抗、龄组SHR大鼠和Wistar大鼠体重为300～350g，24周内皮功能失调、钠潴留以及交感神经的兴奋。然而，随龄组SHR大鼠和Wistar大鼠体重为400～500g。饲养着1991年，胰腺

4、腺泡细胞中血管紧张素(Ang)1a／lb、环境温度为20～25c《=，相对湿度45．65％，昼夜时间比Ang11、肾素在内的。肾素一血管紧张素系统(RAS)成员控制为1：1，自由摄食，自由饮水。适应性喂养1周后mRNA表达的检出，血管紧张素原和血管紧张素转换开始实验。酶在胰腺AR42J细胞系中的发现，高血压对胰岛1．3．2动物模型的制作和取材大鼠禁食不禁水12h功能的影响也渐渐受到重视。高血压会使氧化应激增以后，10％水合氯醛腹腔注射麻醉(300mg／kg)，之后强，引起胰岛组织损伤以及多种功能失调。

5、2013年行颈动脉和股静脉插管术，按照1g／kg的剂量由股静1～2月本实验选择测量自发性高血压大鼠(SHR大鼠)脉导管注射500g／L葡萄糖注射液，并于注射前(0min)微血管密度来评价微循环功能，目的在于从结构形态上以及注射后5、10、30、60min由颈动脉取血1mL，使用探讨高血压对胰岛微血管以及胰岛功能的影响，从而为葡萄糖氧化酶法测定血糖；使用放射免疫法测定血清糖尿病的发病原因以及治疗方面的研究探索新思路。胰岛素，随后，立即剪取胰腺，使用生理盐水冲洗4次1材料与方法后，取小块胰腺尾部组织，标本

6、置于10％甲醛溶液中固定，待做组织切片，HE染色光镜下观察胰岛组织病1．1实验动物10只12周龄雄性SHR大鼠，体重理学形态。300～350g；10只24周龄雄性SHR大鼠，体重400～1．3．3胰岛素表达的测定免疫组化法检测胰岛中500g；10只12周龄雄性Wistar大鼠，体重300～350g；胰岛素的表达，图片采用BiosensDigitalImagingSystem10只24周龄雄性Wistar大鼠，体重400～500g。由北v1．6图像分析软件进行图像分析。结果以光密度值京维通利华实验动物技

7、术有限公司提供。表示。1．2主要药品及仪器CD34鼠单克隆抗体试剂盒、1．3．4胰岛微血管密度的测定采用CD34分子对血胰岛素鼠单克隆抗体试剂盒(美国SantaCruz)；管内皮细胞进行免疫组化染色，每个标本做5张非连SP9002试剂盒、DAB试剂盒(北京中杉生物工程公续切片，每张切片随机选取3～5个胰岛，由两名病理专司)；胰岛素放免试剂盒(天津协和生物科技发展有限业人员独立计数，并除以相应胰岛面积，取其平均值。公司)；PBS缓冲液(郑州鼎国生物技术有限公司)。1．4统计学方法采用SPSS17．0统计

8、软件，组问比RBP一1型大鼠血压计(中日友好临床医学研究所)。较采用单因素方差分析(one—wayANOVA)，组间两两1．3实验方法比较用最小显著性差异(LSD)法。1．3．1动物分组和饲养SHR大鼠和Wistar大鼠，按2结果2．1各组大鼠一般指标比较相同周龄组SHR大鼠河南省医学科技攻关计划项目(编号：2o13o3o78)△通信作者。博士，教授；E～mail：chgtian@sohu．corn，tcg90123@与Wistar大鼠相比较，体重差异无