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时间:2020-05-19
《苏木精等染料的配制.doc》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、常用染料的性质和配制(1)代氏(Delafield's)苏木精 苏木精4g95%酒精25ml 苏木精溶解后,逐滴加入加热(80℃)溶化的10%钱明矾水溶液400ml中,瓶口用纱布封盖,放置光线充足处,3—4天后过滤后再加入: 甘油100ml 甲醇100ml 数日后过滤,两月后成熟,溶液变为蓝紫色,方可使用。放置时间愈长,染色力愈强。此染液为动、植物最常用的细胞核染色剂。染色时间一般为3—5分钟,染色后,细胞质亦稍染上颜色,需用0.1%盐酸水溶液褪去细胞质颜色,保存细胞核颜色,这种区别作用称为分色。 (2)爱
2、氏(Ehrlich's)苏木精 苏木精2g 纯酒精100ml 冰醋酸10ml 甘油100ml 蒸馏水100ml 钾明矾2—3g 先将苏木精溶于25ml酒精,再加甘油和醋酸。然后将其余75ml酒精加入。将钾明矾溶于水中,加热使其溶化,然后慢慢加入苏木精液中,随加随搅,混合后,应放在有光和通风处3星期使其成熟,成熟后为深红色,即可使用。用法与代氏苏木精一样,染细胞核结果极好。 用稀释液慢染脊椎动物胚胎及无脊椎的幼虫,作整体染色效果颇佳。 (3)铁矾苏木精液(又名Heidenhain's苏木精液) 苏木
3、精0.5g 95%酒精10ml 重蒸馏水90ml 将苏木精先溶于10ml酒精中,然后慢慢倒入重蒸馏水中,瓶口用纱布扎紧静置于有光处。约1个月后,苏木精被氧化,溶液变为深琥珀色,即可用。此时要将瓶塞塞好。此液可以放置很久,是较好的染核结构的染色剂。 (4)伊红(Eosin) 伊红又称曙红,为染胞浆、胶原纤维、肌纤维及嗜酸性颗粒等常用的染料,是一种酸性染料。伊红的种类很多,一般分水溶和酒溶两种。 伊红配法很简单,水溶液一般用0.1—1%,酒精溶液用60—96%酒精溶化,浓度与水溶液相同。 (5)苏丹(Sud
4、an)Ⅲ 苏丹Ⅲ0.3—0.5g 70%酒精100ml (6)莱氏(Wright's)染料 莱氏染料(粉末)0.1g 甲醇(A.R)60ml 先把染料放入研钵研细后,加入少量甲醇反复研磨,最后将全部甲醇加入研匀后,用吸管吸入棕色瓶保存备用。 莱氏染料是最常用的血涂片染料。 (7)姬氏(Giemsa's)染料 姬氏染料(粉末)0.75g 甲醇50ml 纯甘油50ml 将染料溶于甘油,置于50—60℃的温箱内7—8小时,每隔1小时摇动1次,然后加甲醇混合后,静置一夜便可使用。 染色法先将涂片用甲
5、醇固定1分钟,然后用上液1份,加蒸馏水(或pH6.4的缓冲液)9份,染15—30分钟,取出用蒸馏水洗去染液晾干镜检:如颜色过蓝,可用醋酸1滴加入200ml蒸馏水快洗数秒,至血膜呈粉红色或橘黄色为宜。 血涂片的染色对染液酸碱度要求比较严格,用蒸馏水作为稀释液,难以得到满意结果,最好用缓冲液来调节染液的酸碱度,效果较好。 (8)马瑞氏(Mallory's)三色液(改良) 橘黄Glg 苯胺蓝(水溶)0.5g 酸性品红1.5g 磷钼酸0.5g 蒸馏水100ml 先将磷铝酸溶于加热40℃的蒸馏水中。然后按次序加
6、入橘黄G、酸性品红、苯胺蓝,逐步依次溶解。此染色为结缔组织良好的染色剂,适合于食道、气管、胃、肠、神经节及腺上皮组织的染色。组织用包音氏、任克氏液固定,可得艳丽的红、黄、蓝3种颜色。 (9)常用染料的溶解度 在100ml溶剂(蒸馏水及95%酒精)中在室温19—26℃下,各种常用染料的溶解度见附表1、附表2。
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