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1、技术交流啤酒酵母的保藏方法刘秉和t河北宣化钟楼啤酒集团有限公司510)007,,,啤酒酵母菌种的质量好坏对啤酒的酿造质量至关重要即使是一株优良的酵母菌株。,,也可能由于保藏不当产生变异或退化因此必须根据本厂的实际条件切实做好保藏工。、、。、作菌种保藏的条件不外乎低温缺氧干燥几种方法啤酒酵母的保藏可分原菌种保藏。生产现场保藏和回收酵母泥保藏三种情况一、原菌种的保藏,:原菌种的保藏方法很多归纳为六类.1斜面低温保藏法,将酵母菌种接种在已经处理过的麦汁琼脂或MYPG琼脂培养基斜面上25士1℃培养,。。2一3天放人0一4℃的冷藏
2、室中保藏每2个月以内需移植一次在生产使用前应进行活化复壮。这种保藏要防止棉塞发霉造成污染或棉塞不紧使培养基水份蒸发等问题。.2液体试管保藏法,,将酵母移入10一1o2P麦汁中20一25℃培养2一3天酵母生长繁殖后自然沉淀然后,,,将试管移人O一4℃冰箱中保存使用时倒去上层清液直接倒人灭菌麦芽汁培养后做接种酵母使用。这种方法也必须两个月移植一次。.3液体石蜡保藏法,,,将要保藏的酵母在固体斜面培养基上2一25℃培养2一3天长成菌落注人经灭菌,,,的无水液体石蜡使石蜡覆盖整个斜面以超过斜面顶端一厘米左右为准使培养物与空气,,
3、,隔绝再将试管顶端的棉塞剪平或用灭菌胶塞用熔化的硬质石蜡密封斜面直立放人2一。,,3℃的冷藏室保藏此法由于与空气隔绝并可防止培养基内的水分蒸发使酵母代谢速度,,。降低延长保藏期限每年只需移植一次.4真空冷冻干燥法..,,此方法需用无菌血清或脱脂牛奶做保护剂将在斜面长好的菌体洗下02一05毫升..,,一,一1x7KPa装人安瓶瓶中接通真空泵压力控制在0680910再将盛菌种悬浮液的安瓶,,瓶放人贮有乙醇的保温瓶内用干冰使乙醇降温至一30一一25℃使菌种悬浮液内的水分升,。,,华干燥最后用火焰熔化安瓶瓶顶部密封冷冻干燥后的酵
4、母最长保种可达10年之久并,。,,,,且存活率高变异率低但也有资料报道此法保种需在暗处存放否则保种三年之后酵。,,母死亡数逐年增加因此对同一批冷冻干燥保存菌种随着使用应检查酵母性能和死亡比。例.5磷酸盐缓冲液保藏..、该法是将麦芽汁琼醋斜面培养好的菌种刮取部分放于02MPH70的灭菌磷酸缓冲,。液中塞上灭菌胶塞于0一4℃左右保藏啤酒酵母在磷酸盐缓冲液中保藏一年无明显的形,。态变异酵母死亡率在10%左右.6蔗糖保藏法技术交流,刮取麦芽汁琼醋斜面上的菌落加人已连续三次灭菌的10%蔗糖溶液中塞上无菌胶,。。塞移人0一4℃冷藏室
5、保藏此法保藏酵母菌种一年无明显变异二、生产现场保藏.1汉生罐保藏法,,汉生罐是酵母菌种扩培过程中使用的培养罐当纯种酵母菌种扩培至汉生罐时在14,。一15℃下保温培养24一48小时然后压出80%左右进人下一级扩培罐留下的20%左右,,,用无菌麦汁补满在12℃培养每12小时通无菌空气20分钟培养72小时后开冰水降温..,。,a至O一2℃保压01一04NMP进行保存此法保种时间最长可达二年从本次保种到下,,。次扩培期间不需更换麦汁菌种活力旺盛.2发酵液保藏法当发酵液中的酵母达到最高峰时,取出一部分于另外的灭菌容器中,然后急速降
6、温冷却。,。到2一4℃保藏此法简单易行可保存一个月,,,有的企业利用发酵罐保藏酵母发酵终了不回收酵母使酵母在酒液中保存此法保种。,,,最长可达30天要求保存酵母没有污染大罐锥底温度0一2℃否则中心酵母产热会发。生自溶、三回收酵母泥保藏,,啤酒厂正常生产用的酵母都是回收后再使用的所以回收酵母保藏是一项日常工作生。:产季节每天都在做回收酵母泥保存有以下方法.1无菌水保藏法,,,酵母回收后加低温无菌水稀释经40一80目筛过滤去除杂质人酵母盆再加无菌水搅,,,,,拌均匀前2天每天换水两次并反复搅拌去除泡沫和杂质以后可每天换水一次
7、不搅拌。。无菌水温控制在2一4℃此法一般只能保持7天左右.2泥状酵母保藏法,。将发酵终了的酵母泥直接收人酵母盆或暂存罐中在0一4℃常压或低压直接使用保。存时间不超过三天.3压榨酵母保藏法、,,将回收的酵母泥过筛洗涤或直接压榨使含水量降低到75一85%破碎成小块后放人,。。。浅盘置于0一2℃保藏使用时无菌水调成泥状即可此法保藏酵母一般不宜超过巧天。必须注意操作过程中的无菌状态.4排气保藏法,,将大罐发酵终了的酵母回收到中间罐使酵母从压力状态逐步减压到常压然后用0一,。,2℃脱氧无菌水进行洗涤在0一2℃无菌水中贮存使用前通无
8、菌空气然后压人发酵罐使。用、四保种方法的评价酵母菌种保藏的目的是要保持酵母纯种性状的稳定,无变异或衰退。最好的方法是真,,,。,,空冷冻干燥法保种时间长存活率高变异率低但手续麻烦需要一定的设备是长期有技术交流效的保种方法。斜面保藏、液体麦芽汁保藏作为生产使用是方便安全的方法。稍长时间的保藏可采用液体石蜡、蔗糖液或磷酸
