我国猪瘟疫苗效力检验的替代方法研究与应用进展.pdf

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1、第35卷第8期家畜生态学报Vo1．35No．82014年8月ActaEcologiaeAnimalisDomasticiAug．2014我国猪瘟疫苗效力检验的替代方法研究与应用进展张占龙，宋永鸿，李敏。，李梅霞(1．青海省化隆县畜牧局，青海化隆810900；2．青海省动物疫病预防控制中心，青海西宁810003；3．青海省贵南县过马营乡畜牧兽医站，青海贵南813101)[摘要]我国兽药典中现行的猪瘟疫苗效力检验方法存在试验成本较高、周期较长、操作较繁琐、重复性较差、敏感性较低等缺点，随着分子生物学与免疫学技术的日臻发展与应用，猪瘟疫苗效力检验的新

2、兴替代检验方法不断发展和完善。论文就我国近年来针对猪瘟疫苗毒种、半成品、成品效力检验的新兴分子生物学和免疫学检测方法的研究与应用进展做一简要综述，旨在为提升我国猪瘟疫苗效力检验水平提供合理的科学依据。[关键词]猪瘟疫苗；效力检验；替代方法；研究与应用[中图分类号]$811．6[文献标识码]A[文章编号]1005—5228(2014)08—0086—04猪瘟(ClassicalSwineFever，CSF)是由猪瘟病法的研究与应用进展做一简要综述，为提升我国猪毒(ClassicalSwineFeverVirus，CSFV)引起的一种瘟疫苗效力检验

3、水平提供合理的科学依据。高度接触性、致死性的猪传染病。猪瘟在世界范围1qRT-PCR方法内流行，每年给全球养猪业带来了巨大的经济损失口]，该病被世界动物卫生组织列为A类烈性传qRT—PCR方法可以对猪瘟病毒核酸含量进行染病，被我国农业部列为一类动物疫病，是目前阻碍准确定量，与兔体定型热反应方法相比，具有快速、着我国养猪业的健康发展的首要动物疫病L3]。我敏感、高通量和实时等优点，为猪瘟疫苗毒种、半成国采用猪瘟兔化弱毒疫苗(C株)强制免疫接种为主品、成品中病毒含量的测定提供了新的技术方法。要防治措施，使猪瘟在我国得到了有效控制，猪瘟频Lin等]应

4、用qRT—PCR方法对猪瘟培养细胞中的发的大流行状况已得到根除[5]，但近年来，我国猪瘟病毒含量进行实时监测，qRT—PCR方法较免疫荧光疫苗免疫失败的病例逐渐增多，周期性、波浪式的地方法具有更高的敏感性，且检测快速、定量准确，可区散发性流行日益严重_6]。导致疫苗免疫失败的原以将其用于猪瘟毒种与半成品的生产中确定最佳收因很复杂，除了免疫程序不合理、母源抗体的干扰等毒时间，从而提高猪瘟疫苗质量。陈锴等口叩建立的原因外，疫苗效力达不到要求是其中一个重要原定量检测猪瘟兔化弱毒疫苗病毒核酸含量的qRT—因_7]。由于猪瘟病毒不易产生细胞病变，因此兽药

5、PCR方法仅能扩增猪瘟兔化弱毒疫苗株，最低可检典中对其抗原病毒含量或疫苗效力检验主要依靠家测到4．35个cDNA拷贝量，该方法与兔体定型热兔或猪进行动物试验[8]，因用猪进行检验成本太高、反应同时对4个厂家17个批次的34份猪瘟疫苗进试验操作难度太大、周期太长，故在生产实际中多采行效力检验，二者表现出了良好的相关性。葛叶用兔体定型热反应方法，该方法仍然存在试验周期等En]采用qRT～PCR方法与兔体定型热反应对5份较长、操作较繁琐、重复性较差、敏感性较低等缺点，猪瘟兔化弱毒细胞苗成品和6份半成品样品进行平且受试验动物的个体差异、环境因素等多方面

6、原因行检测，结果表明qRT—PCR方法检测结果中最低影响，检测结果不是十分准确。随着分子生物学与105个病毒拷贝可以使家兔产生定型热反应，最低免疫学技术的日臻发展与应用，猪瘟疫苗效力检验103个病毒拷贝可以使家兔产生轻热反应，qRT-的新兴替代检验方法不断发展和完善。本文就我国PCR方法的检测过程仅需3．5h，大大缩短了猪瘟近年来针对猪瘟疫苗毒种、半成品的效价检验和成疫苗的检测时间，可以补充传统的兔体定型热反应品疫苗效力检验的新兴分子生物学和免疫学检测方用于猪瘟兔化弱毒疫苗半成品与成品的检验。韩文[收稿日期]2o14—04—17，修回日期：20

7、14—05一ol[作者简介]张占龙(1978一)，青海化隆人，本科，研究方向：疾病预防和控制。E-mail：zhangzhanlong1978@qq．corn第8期张占龙，等：我国猪瘟疫苗效力检验的替代方法研究与应用进展87等[1。]利用qRT—PCR方法对278批次猪瘟疫苗进行成品疫苗；该试剂盒和兔体定型热反应测定4个批效力检验，有66批次(24)疫苗病毒含量达不到次24份HCLV半成品细胞苗的抗原含量，二种方兽药典要求标准，抽取其中6份采用兔体定型热试法的符合率高达95．8，但该方法无法区分猪瘟病验进行验证，两种检验方法的结果完全一致，表明

8、毒抗原与牛流行性腹泻病毒抗原。肖锋等[】研究qRT—PCR方法可以作为评价猪瘟疫苗质量的一种也表明进口猪瘟抗原／血清ELISA试剂盒能够稳替代方法。总