牛流行热活毒疫苗之研发.pdf

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1、第3期

2、毫一牛流行热活毒峻苗之研发一配不活化疫苗的方法免疫牛只安全性高，毒力减、前言牛流行热是由杆状病毒(Rhabdovirus)所引弱的病毒虽然本身诱发中和抗体的能力不高，但起之急性发热性疾病，在牛之间并不会经由直接其具有的致敏作用(primingeffect)却可使牛只接触、体液或空气传染，须透过库蠓等吸血性节对于之后施打的不活化疫苗迅速产生反应，制造肢动物做为媒介来传播疾病，目前仅有一种血清出大量的中和抗体。甚至10TCID50的病毒量即型。以乳牛、黄牛、水牛为主要宿主，但亦曾在具有致敏作用。为防范牛流行热疫情造成养牛户鹿及羚羊体内发现有牛流行热的抗体存在

3、，目前经济上严重损失。除现有之不活化疫苗外，本会没有感染人的病例报告。牛流行热病毒属单股家畜卫生试验所(畜卫所)利用分离自日本之牛RNA病毒，结构包括封套与五个结构性蛋白(L、流行热活毒疫苗病毒YHL株研发活毒疫苗以加强G、N、M1与M2)，其中又以G蛋白最重要，因基础免疫。逐步完成活毒疫苗之各项试验，冀能为此蛋白含病毒的专一性及中和性抗原部位，可生产具良好免疫性之活毒疫苗以有效预防疾病。引发牛只的免疫反应并保护牛只不受感染。在临三、研发成果床上．病牛会出现高热、开口呼吸、流涎、四肢病毒增殖采用HmLu一1细胞．先进行细胞生僵硬、跛足、关节疼痛等症状，其中泌乳量

4、遽减长试验以了解细胞生长速度。之后再建立病毒增常造成重大损失。殖曲线。发现在175平方公分(175T)之细胞角1967年台湾首次出现疫情后，分别在1983、瓶与850平方公分旋转培养瓶分别种入5x106与1989、1996、1999、2001、2004、2007年又有疫5x107个细胞2天后可以形成单层细胞，形成单情发生，可见本病平均每几年流行一次，呈现周层细胞后即可接种病毒。病毒力价不论是在角瓶期性爆发现象，而间隔似乎有缩短的趋势，过往或旋转培养之细胞皆于接种2天后达最高，约为发生的型态多是大流行．1999年后则变成散发，107TCID5o／mL。并多集中于夏

5、秋两季，甚至到十月份仍有病例发在安全试验中．选定牛流行热抗体阴性之6现．与气候变迁的暖化效应及台风后病媒蚊数量月龄娟姗牛三头及荷兰乳牛两头。于试验前7天增加是否相关，十分值得探讨。防治之道除加强开始每日2次量测肛温以记录体温变化。牛只于防治病媒蚊外，更需藉助疫苗免疫牛只以产生抗皮下注射YHL病毒后再持续量测体温14天，同体对抗病毒，根据研究，血清中和抗体力价需大时观察牛只是否出现任何异状或不良反应，结果于或等于32倍才能有较好的保护效力不被野外五头牛在l4天内并未出现发热或其他不良反应。病毒感染。而完成安全性试验之牛只继续进行效力试验，于二、活毒疫苗研发YHL病

6、毒注射3周后以本所生产之牛流行热不活台湾目前施打之疫苗为不活化疫苗，乃将病化疫苗经肌肉注射1剂量完成基础免疫。接着牛毒经化学方法处理使其失去复制、繁殖能力，优只于YHL疫苗注射后第4周再注射本所生产之牛点是安全性高，因为病毒不会感染细胞进行增流行热不活化疫苗，结果发现血清中和抗体力价殖，所以无毒力恢复和潜伏感染之疑虑。但也因开始快速上升，于实验第6—7周上升至高峰．抗此，不活化疫苗中的病毒为外源性抗原，仅能刺体中和力价可达128倍与256倍，之后就逐渐下激体液免疫，抗体在经过一段时间后会自然慢慢降，于半年后再补强一次不活化疫苗，抗体又会的衰退，初生小牛接种第一剂

7、疫苗数周后必须补快速上升，可达5l2倍与256倍试验结果显示强第二剂．之后每年亦需补强注射。不断刺激抗YHL活毒除安全外，与不活化疫苗搭配使用诱发体产生，才能达到理想免疫效果。抗体产生的能力亦具有不错的效果。日本方面曾研究指出，以YHL株活毒疫苗搭四、讨论圆囊第3期曾有文献针对牛流行热病毒可诱发中和抗体情，除了与环境中极难根除的病媒蚊有关外，不确产生的G蛋白进行基因序列分析，结果发现亚洲实的免疫注射也造成牛群体内缺乏一致的抗体保护株与澳洲株为不同的基因群。而亚洲株又可区分力，因此一旦被畜舍周围带有病毒的库蠓叮咬．疫成台湾株与El本株两个基因群。因此以分离自日情就

8、此爆发，尤其台湾的畜牧场多处于田间杂草本的YHL病毒株制造之活毒疫苗，是否适合在台林木丛生提供了蚊虫极佳的隐匿场所，在无法保证湾使用，在未来推广上将是一值得重视的议题，牛群不会被叮咬的情况之下，加强疫苗的预防接种惟畜卫所将mm制造不活化疫苗所使用的Vac一1984就极为重要了，若能再配合病媒蚊数量的控制．双与YHL做比较，两者G蛋白核酸相似度高达管齐下，才能有效达到防治目的。97％。以高免血清进行血清交叉中和试验，也发而开发活毒疫苗的目的是希望能同时诱发细现以YHL病毒进行连续免疫，产生的抗体亦能有胞与体液免疫以弥补不活化疫苗的不足．活毒本效中和Vac一1984

9、病毒，且与中和YHL的能