芒果细菌性角斑病菌细胞壁降解酶反应条件优化.pdf

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1、72广东农业科学2015年第8期芒果细菌性角斑病菌细胞壁降解酶反应条件优化张大智一，詹儒林，柳凤，李国平，赵艳龙，常金襻(1．海南大学环境与植物保护学院，海南海El570228；2．中国热带农业科学院南亚热带作物研究所，广东湛江524091)摘要：为优化出芒果细菌性角斑病菌细胞壁降解酶酶活性的反应条件，采用3，5一二硝基水杨酸法(DNS法)，分别测定以l％羧甲基纤维素钠(CMC)、0．5％CMC+0．5％果胶和l％果胶为诱导底物的细胞壁降解酶活性，并从温度、时间、pH等方面优化酶活性测定条件。结果表

2、明：在3种主要细胞壁降解酶中，羧甲基纤维素酶(cx)以1．0％CMC作为底物诱导效果最好，多聚半乳糖醛酸酶(PG)和果胶甲基半乳糖醛酸酶(PMG)以1．0％柑橘果胶作为底物诱导效果最好。cx和PG的最适反应温度分别为60％和50％，最适反应时间分别为60min和20min，当pH分别达到4．6和6．6时，Cx酶和PG的酶活性最强。关键词：芒果细菌性角斑病；细胞壁降解酶；反应条件；酶活性中图分类号：$436．67文献标识码：A文章编号：1004—874X(2o15)08—0072—05Rte~acti

3、onconditioOnso,ptimizationofce．4l1lwalldeg~radaingenzymesfrommangobacterialleafspotpathogenZHANGDa—zhi，，ZHANRu—lin，LIUFeng，LIGuo—ping，ZHA0Yah—long，CHANGJin-mei(1．CollegeofEnvironmentandPlantProtection，HainanUniversity，Haikou570228，China；2．SouthAsiaTrop

4、icalCropResearchInstitute，ChineseAcademyofTropicalAgriculturalSciences，Zhanjiang524091，China)Abstract：TooptimizethereactionconditionsofcellwalldegradingenzymesfrombacterialleafspotpathogensofMangiferaindicaLinn(mango)，3，5一dinitrosalicy1icacidmethod(DNS

5、method)wasusedtodeterminetheactivitiesofcellwalldegradingenzymes(CWDEs)withtheinductionsubstrateof1％sodiumcarboxymethylcellulose(CMC)。0．5％CMC+O．5％pectinand1％pectin。respectively；andtheseCWDEsassayconditionsintermsoftemperature，time，pH，ectwereoptimized．T

6、heresultsshowedthat，1．0％CMCwasthemostsuitablesubstratefortheinductionofcarboxymethylcellulose(Cx)，whereas1．0％pectinwasmostsuitablefortheinductionofpolygalactur0nase(PG)andpectinmethy1galactuionase(PMG)．TheactivitiesofCxandPGwerethehighestat60％and50℃，re

7、spectively，for60minand20min，respectively；theactivitiesofCxandPGwerethehighestwhenthepHvaluereached4．6and6．6，respectively．Keywords：mangobacterialleafspot；cellwalldegradingenzymes；reactioncondition；enzymeactivity收稿日期：2014—12—13由野油菜黄单孢菌芒果致病变种(Xanthomonas基

8、金项目：中央级非盈利性研究机构基本科研业务费campestrispv．mangiferaeindicae)引起的芒果细菌『生角专项(1630062014007)；国家公益性行业(农业)科研专项斑病是芒果生产上的主要病害之一，该病危害芒果叶(201203092—3)片、枝条、花芽、花和果实等部位，植物被侵染后表现作者简介：张大智(1989一)，男，在读硕士生，E—mail：出黑褐色病斑、表面隆起等症状。该病在我国芒果主zhangdazhi102@163．con产区普遍发