人（humn）I型胶原C端肽CTX1.doc

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1、人（human）I型胶原C端肽CTX1本试剂盒仅供研究使用标本：血清或者血浆一、试剂组成精密度微孔板96孔（MicrotitrationStrips）1块2～8℃干燥保存酶标偶合液（Conjugate）1瓶12.0毫升2～8℃冷藏保存标准品（Standard）5瓶各1.0毫升2～8℃冷藏保存呈色剂A（SubstrateA）1瓶6.0毫升2～8℃避光冷藏保存呈色剂B（SubstrateB）1瓶6.0毫升2～8℃避光冷藏保存终止液（StoppingSolution）1瓶6.0毫升室温保存20倍浓缩洗涤液（Rinsi

2、ngBufferx20）1瓶60.0毫升2～8℃冷藏保存5倍浓缩样品稀释液（Diluentx5）1瓶15.0ml2～8℃冷藏保存英文说明书，中文说明书各一份室温保存二、注意事项1.此试剂为体外检测试剂，效期内使用，试剂应视为传染物，不同总批号的试剂不能混用。2．使用前应将盒内各试剂取出。室温放置至少30分钟，3．浓缩洗涤液出现结晶后，请于37℃孵育15分钟。4．浓缩样品稀释液出现结晶后，请于37℃孵育15分钟5．若24小时内进行实验，标本可存放于2～8℃。不需及时实验，标本-20℃保存，避免反复冻融。6．在反复

3、清洗微孔板，并扣干微孔中的残余液体，否则将降低精确度，造成吸光度偏离的假像。7．加样完毕后，应注意轻微摇动微孔反应条，以便使孔中的液体充分混匀。8．试剂盒保存于2～8℃，请勿冷冻，有效期请见盒内标示。三、实验前准备1．使用前应将盒内各试剂取出，室温放置至少30分钟。2．准备各种实验仪器及材料，如微量移液器，吸头，医用蒸馏水等3．浓缩洗液与医用蒸馏水1︰19倍稀释后成为应用洗涤液4．浓缩样品稀释液与医用蒸馏水1︰4倍稀释成应用样品稀释液5．用应用样品稀释液来稀释样品，按照1：100的体积比来稀释样品如10μl的样

4、品加入到1ml的应用样品稀释液中，充分混匀待用。）四、操作步骤1．取出酶标板，设空白孔，依照次序对应分别加入100μl的标准品于空白微孔中（空白孔视为0号标准品，用医用蒸馏水替代）2、分别标记样品编号，加入100μl的稀释样品于空白微孔中（不同的样本采用不同的吸头）。3、将酶标板置于37℃温育30分钟；4、将酶标板板取出，将其中的液体甩去，每个孔中全部加满应用洗涤液后，立即甩去液体;5、每个孔中加满应用洗涤液后，轻微振摇酶标板30秒后将孔中的应用洗涤液甩去，在吸水纸上将酶标板拍干。6、重复第5个步骤5次，在吸水

5、纸上将酶标板拍干。7、在标准品孔和样品孔中加入100μl的酶标偶合溶液。8、将96孔板置于37℃温育30分钟。9、将酶标板取出，将其中的液体甩去，每个孔中全部加满应用洗涤液后，立即甩去液体。10、每个孔中再次加满洗涤应用液后，室温轻微振摇酶标板30秒后将孔中的应用洗涤液甩去，在吸水纸上将酶标板拍干。11、重复第5个步骤5次，在吸水纸上将酶标板拍干。12、在每个孔中加入底物A50μl后立即加入底物B50μl。轻轻振荡混匀。（A液、B液采用不同的吸头加样）13、将酶标板置于37℃避光温育反应15分钟。14、每个微孔

6、中加入50μl的终止液，轻轻振荡混匀。15、在酶标仪上，450nm处测定OD;显色后，15分钟内进行测定。16、根据制备的标准曲线，计算样本含量五、结果判断1.仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值；2、检测值范围：0－12nmol/L3、敏感度：0.1nmol/L