医学科研方法课题

《医学科研方法课题》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、孕妇与不孕症妇女解脲支原体、沙眼衣原体感染的研究　要迎春一、课题名称：孕妇与不孕症妇女解脲支原体、沙眼衣原体感染的研究二、立项依据：解脲支原体（Uu），沙眼衣原体（Ct）感染在临床上非常多见,已经成为医学界普遍关注的问题.孕妇和不孕症妇女都是Uu和Ct的易感人群，Uu,Ct是孕妇和不孕症妇女生殖道感染的最常见的两种病原微生物，我们就妊娠期和不孕症患者Uu,Ct感染作出初步研究，研究两者Uu和Ct感染的情况，以便进一步做好围产期保健，提高妊娠质量及查找不孕症患者的病因，便于临床治疗。　三、研究方案1、研究目标：了解孕妇与不孕症妇女解脲支原体(Uu),沙眼衣原体(Ct)

2、感染的情况.方法：孕妇534例和不孕症患者124例分为两组取其宫颈分泌物检测Uu，CtDNA，并抽取空腹血清，采用Uu,Ct蛋白芯片方法检测两组血清中的Uu，CtIgG抗体，以了解两组患者Uu,Ct感染的情况.结果：孕妇与不孕症妇女Uu感染率无统计学差异，而Ct感染率则不孕症妇女明显高于孕妇(P0.05).结论：Ct感染在不孕症的病因中更具意义。2、研究对象：1、对象200307/200402来我院妇产科和生殖门诊就诊的孕妇534例和不孕症妇女124例（丈夫精液分析正常，多数为继发性不孕患者），检测其血清Uu和CtIgG抗体及宫颈分泌物Uu和CtDNA3、研究的方法

3、①用PCR方法检测孕妇及不孕症妇女宫颈分泌物Uu和CtDNA，其取材方法是：用扩阴器扩开阴道后，取消毒棉拭子，拭净宫颈外口分泌物，弃去.再取一支棉拭子，伸入宫颈管内，停留30s，沿管壁旋转3wk后取出.放入装有1mL无菌生理盐水的试管中，充分悬浮，再挤干拭子中的水份，取出拭子，弃去.试管于-4℃冰箱保存待检.试剂由上海复星医学科技发展有限公司提供，操作严格按照试剂盒说明书进行.扩增产物经含EB染色剂的琼脂糖凝胶电泳，将凝胶置于紫外检测分析仪上观察，如在450nm处出现橙黄色条带，则标本中有Uu核酸存在，如在225nm处出现橙黄色条带，则标本中有Ct核酸存在.检测结果

4、见Fig1.②用蛋白芯片(南京大渊生物医学试剂有限责任公司)方法检测两组血清中的Uu和CtIgG抗体.此蛋白芯片是渗滤式免疫反应芯片，使用间接法原理，胶体金标记.可分型检测，多项同检.以微孔滤膜为载体，利用微阵列技术将纯化的UuI,II群及CtLGV,CtBT群特异性蛋白固相于同一膜片上，并利用微孔滤膜的渗滤、浓缩、凝集等，使病原抗体反应在固相膜上快速进行，再以免疫金作为标记物直接在膜上显色，显色后的芯片放入芯片识别仪，在专门软件支持下对不同点阵的灰度值进行分析，实现了对两种病原体的抗体进行同步检测.4、资料统计分析：采用SPSS统计软件11.5进行统计学分析，χ2

5、检验.P0.05,认为差异有统计学意义.5、可行性分析2.1孕妇与不孕症妇女宫颈分泌物Uu和CtDNA检测情况将不孕症患者组设为第一组，例有文献报道，PCR检测法检测Ct灵敏度及特异性可达94％～100％，可作为临床检测的实用方法，尤其适用于Ct感染的早期诊断和无症状携带者的检查.蛋白芯片法目前正开始应用于临床，蛋白芯片法是一种检测Uu和Ct的新方法，具有快速、简便、经济等优点，但其准确率稍低于PCR检测法.我们采用PCR检测法和蛋白芯片法同时检测，可提高检测数为124例，孕妇组为第二组，例数为534例.两组患者采用PCR方法检测Uu和CtDNA不孕症患者Ct感染率

6、显著高于孕妇组（P<0.05）.不孕症患者与孕妇Uu的感染率无统计学差异，均在33%左右.两组Uu和Ct感染的总阳性率无统计学差异2.孕妇与不孕症妇女蛋白芯片法检测两组血清中的Uu，CtIgG抗体情况同样将不孕症患者组设为第一组，孕妇组为第二组.两组患者采用蛋白芯片法检测两组血清中的Uu和不孕症患者与孕妇染率无统计学差异。6、研究成果　　Uu和Ct感染是不孕症的重要因素.女性感染支原体可导致生殖道炎症，使黏膜细胞坏死，输卵管纤毛运动停滞，引起不孕［1］.不孕症妇女Uu和Ct感染的阳性率,各地报道不一,Uu感染率为27.2%～47.1%,Ct感染率为23.8%～44.

7、1%［2-4］.本研究中，不孕症妇女Uu感染率为33.06%～37.10%，与各地报道一致，但Ct感染率在10％以下，显著低于前述研究，可能有地域差异.不孕症患者Uu和Ct感染的阳性率明显高于正常未怀孕妇女.孕妇Uu感染率可高达40%～80%.Ct感染率国内报道为1%～34%，国外报道为2%～47%［5，6］.一般人群支原体感染率为19.35%，衣原体感染率为0.05%［7］.妊娠时由于多种激素水平的改变，机体内环境变化从而更适于一些微生物的生长，其中包括Uu和Ct的繁殖，此外，妊娠期妇女处于免疫抑制状态，多种病原体乘虚而入，所以孕妇的Uu和Ct感染率较正常非孕