山东省奶牛A型口蹄疫免疫抗体检测与分析.pdf

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1、西南民族大学学报‘自然学版JuI．2olo第36卷第4期JoumalofSouthwestUniversityforNationalities·NaturaIScienceEdition文章编号：10o3．2843(2010)04·0593-04山东省奶牛A型口蹄疫免疫抗体检测与分析陈静’，马慧玲，陈华2孙圣福。，王贵升1t兰邹然，李云岗It田夫林(1．山东省动物疫病预防与控制中心，山东济南250022；2．山东省畜牧兽医信息中心，山东济南250022)摘要：应用ELISA方法对山东省内应用了口蹄疫A型灭活疫苗34个奶牛饲养户进行了免疫抗体跟踪监测与分析．结果：对

2、l8家养牛户进行了免疫抗体检测，各牛场平均抗体合格率为42．4％其中抗体合格率最高的奶牛场其合格率只有65％，低的只有12．5o／o'一免后所有l8个奶牛场均未达到免疫合格标准；二免后16个奶牛场平均抗体合格率为69．4％，其中，抗体合格率至70％的有l0个牛场，达到免疫合格标准二次免疫后有62．50／410／16)的达到免疫合格标准．研究表明对于A型口蹄疫疫苗的免疫，首免后必须进行加强免疫．关键词：A型口蹄疫；疫苗；ELISA；抗体检测中图分类号：$858．23文献标识码：A口蹄疫病毒(FootandMouthDiseasevirus，FMDV)是口蹄疫(Foo

3、tandMouthDisease，FMD)的病原体，共有7个主型，即甲型(A型)、乙型(O型)、丙型(C型)、南非1型、南非2型、南tlz3型和亚洲I型，其中以A型和O型布最广，危害最大．A型口蹄疫是牛、羊、猪等的一种急性、热性传染病，是一种严重危害畜牧业正常发展、影响经济发展和社会稳定的重大动物传染病，在国际上被称为“政治经济病”，国际兽疫局(OLE)将其列为国际动物卫生法典中的A类病之首．该病具有病毒抵抗力强，传播途径广，远距离跳跃式传播的特点．牛、水牛、猪、绵羊、山羊、驯鹿等偶蹄动物及人均可被感染．目前国内外主要采取给易感动物接种疫苗的措施预防和控制该病，而

4、疫苗免疫效果的好坏直接关系到口蹄疫的防控效果，抗体水平监测即是对免疫效果的直观评估．为了搞清A型口蹄疫疫苗在牛体中的免疫应答规律及其免疫效果，摸索出一套合理的免疫程序，以指导本地区的A型口蹄疫防控工作，我们对山东各地市的牛场进行了口蹄疫疫苗免疫抗体监测与分析．I材料与方法1．1疫苗及主要诊断试剂疫苗为中农威特生物科技股份有限公司生产的El蹄疫A型灭活疫苗．口蹄疫抗体ELISA检测试剂盒由中国农业科学院兰州兽医研究所提供，批号为2008040702．1．2血清采集山东省34个奶牛场共633份血清，其中一免后采样的奶牛场18个血清337份，二免后采样的奶牛场16个血清

5、296份．1-3检测方法应用口蹄疫A型抗体液相阻断EL1SA检测试剂盒对牛血清进行A型口蹄疫免疫抗体水平检测，检测方法按照试剂盒说明书进行．1．4结果判定收稿日期：2010．06．02作者简介：陈静(1969-)，女，山东禹城人，山东省动物疫病预防与控制中心高级兽医师．E·mail：chenjing6809@sina．com通讯作者：田夫林，E-mail：fulin_tian@yahO0．corn．cn基金项目：山东省泰山学者建设工程专项项目；规模鸡场禽流感新城疫综合防控技术集成与示范项目(2006BAD06A16)594西南民族大学学报·自然科学版第36卷以病毒

6、抗原对照平均OD492值的50％为临界值，被检血清稀释~LOD492值大于临界值的孔为阴性，小于或等于临界值的孔为阳性．孔的oD92m值等于临界值时所对应的稀释度为该份血清的抗体滴度．定性检测中，两个重复孔只要有一孔为阳性孔，则抗体滴度判定为l：128，两孔均为阳性孔，则判定为抗体滴度>1：128．血清抗体滴度三1：128时，判定口蹄疫A型抗体效价合格．存栏家畜免疫抗体合格率7O％时判定为疫苗免疫合格．2结果与分析．^2．1首免后牛口蹄疫A型抗体检测结果的通过ELASE~J]试剂盒对18家奶牛场共337份血清进行了首免后牛口蹄疫A型抗体检测，检测结果见表l表l牛A

7、型口蹄疫首免后抗体检测结果如表1所示，通过ELASE抗体检测试剂盒对18家养牛户共337份血清进行了免疫抗体检测，各牛场平均抗体合格率为42．4％，其中抗体合格率最高的奶牛场其合格率只有65％，低的只有12．5％．一免后奶牛个体平均抗体水平合格率变化规律见图1．20d30d∞d首免后天数Th·daystfterimmuit*tiOn图l一免后奶牛个体平均抗体水平合格率变化规律第4期陈静等：山东省奶牛A型口蹄疫免疫抗体检测与分析595由图l可知，一免后20天左右抗体水平平均合格率达到30％，在一免后2个月左右达到最高值为61．7％，而在9O天左右抗体水平合格率又将为

8、45．8％