青海部分地区人和动物血清弓形虫抗体检测.pdf

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1、ChineseJournalofVeterinaryMedicine中国兽医杂志2013年(第49卷)第5期49青海部分地区人和动物血清弓形虫抗体检测马利青，韩秀敏，蔡其刚，郑宜，陆艳，王戈平，叶成玉，牛小迎(1．青海省畜牧兽医科学院，青海西宁810016；2．青海省地方病预防控制所，青海西宁810007)中图分类号：R446．6文献标识码：B文章编号：0529—6005(2013)05—0049—02弓形虫病，是由龚地弓形虫(Toxophasmagon—到Escherichiacoli(E．coli)上，最后获得rSAG1。dii)所引起的人畜共患病。虫体可以感染温血动物1．2被检血

2、清的采集和处理1090份被检血清的许多属，包括人。动物通过吃了已经被猫科动物分别来自孕妇的51份，藏系绵羊的220份，藏獒的粪便污染的肉，或者通过母体传给胎儿的方式感染，192份，马的314份，骆驼的144份，喜马拉雅旱獭未经加工的生肉也是造成该病在人群中传播的原的68份，高原鼠兔的39份，中华鼢鼠的12份，藏羚因，同时手被猫粪便污染也是风险因素。估计在全羊的2份，实验小鼠的48份。采血时均空腹、颈静世界约有1／3的人口中存在弓形虫的感染[】]。美国脉或心脏或眼眶眼底采集，采集后摆成斜面，置4℃疾病控制和预防中心报道了从1999年到2004年的冰箱5h后，放在室温待血清析出后收集血清，

3、血清流行病学检测结果，血清阳性率为1O．o8，处一2O℃冷冻保存待检。于分娩阶段的妇女的阳性率为l1左右(15岁-441．3其他试剂和耗材均购自国内和Sigma公司岁)_2]。为了解弓形虫在青海省这样一个相对封闭供应商。的高海拔地区人群和不同动物之间的流行情况，我1．4ELISA诊断们于2010年5～1O月份，利用ELISA诊断方法，对1．4．1抗原的包被抗原GST—SAGlt和GST，按近期所收集的青海地区的孕妇、藏系绵羊、马、藏獒、5／~g／mI剂量加到包被液中(50mmol／Lcarbonate骆驼、喜马拉雅旱獭、高原鼠兔、中华鼢鼠、藏羚羊和bicarbonateBuffer，p

4、H值9．6)，混匀后加到96孔实验小鼠的血清样品进行检测，现报道如下。平底微量板(Castor)的孔里，每孔5OL，并且在1材料与方法4℃条件下培养过夜。1．1抗原弓形虫的标准阴阳性血清由日本国家1．4．2封阻用含有0．05Tween20的PBS原生动物疾病研究控制中心提供，青海省畜牧科学(1O0mL10×PBS+900mL蒸馏水+0．5mL院所生物技术研究室保存。重组的弓形虫表面融合Tween20)冲洗1次后，残留的粘附物的部位用含蛋白(rSAG1)，按照管刚等介绍的方法进行]。3脱脂乳的封阻液(3g脱脂乳粉+9OmL蒸馏水rSAG1简介如下：由基因编码的T．gondii表面蛋+10

5、mL10×PBS)进行封阻，每孔100L，并在白1(SAG1)被克隆到pGEX一4T一3质粒上，再表达37℃条件下培养1h。l_4．3加样随后微量板用冲洗液冲洗6次，在封阻液中按1：100滴度稀释收稿日期：2012—06—2O被检血清后，每个样品平行加到微量板的两个孔中，基金项目：科技部国际科技合作项目(2007一FDA一31350)每孔5OL，并在37℃条件下培养1h。4．3受冻外界气温低时，仔猪在出生后，如不注猪口腔舌根部，喂前将猪嘴挤开，也可用链霉素100意保温会导致仔猪冻死。因此，母猪产仔时，当外界万g调凉开水喂服，每只仔猪每次5～10万g，每温度低于12℃时，就应采取加温、保

6、温措施。天2次，连喂3d。4．4管理不善如仔猪被母猪咬噬、脚踏或挤压而参考文献：死亡，其中尤以压死为多。所以，在仔猪出生后3d[1]邢艳君．哺乳仔猪死亡率过高的原因及防制[J]．山东畜牧兽医，2012(5)：53—54．．内，必须有专人值班。[2]余成林．仔猪腹泻的病因及综合防治Fj]．畜牧兽医科技信息，4．5防治仔猪黄痢仔猪出生4h～3d，常患黄痢2O12(2)：69-70．病，患猪精神委靡，脱水消瘦，死亡率极高。所以，母[3]王宝昌．仔猪腹泻的预防和治疗[J]．新农业，2003，11：33．猪分娩前应做到圈舍干净，可用石灰、草木灰消毒清[4]刘芳，杨正文．哺乳仔猪的饲养管理要点[J

7、]．山东畜牧兽医，2011(10)：14-15．扫，母体应用0．3高锰酸钾液擦洗乳头、阴部，仔Es]秦卫忠，李秋艳，谭九林．预防和治疗哺乳仔猪腹泻的一种方法猪产下后不管是否患黄痢，每头仔猪均喂服1片调[J]．黑龙江畜牧兽医，2002(4)：61．痢生片，每天1次，连喂2～3d，方法是，将药片研细[6]张洪友，杨隽，刘胜军．一起断奶仔猪死亡病例的诊治[J]．中国用少量温开水调成糊状，用薄小竹片取药糊抹入仔兽医杂志，2001，37(7)：50-51