脊髓损伤诱发Leydig细胞凋亡与PARP、FAS基因表达.pdf

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1、虫垡监匡塞盍(盐王遂)2笙月第8卷第17期ChinJClinicians(ElectronicE(uti0n1．Seotember1．2014．Vo1．8．№．17·53·基础论著脊髓损伤诱发Leydig细胞凋亡与PARP、FAS基因表达龚永光杨敏马艳民【摘要】目的研究切除精索神经对Leydig细胞凋亡和PARP、Fas基因表达的影响。方法成年健康SD大鼠2O只，随机分为假手术组和脊髓损伤组，手术后14d以Percoll连续密度梯度法提取Leydig细胞后采用流式细胞仪(FACS)定量检测Leydig细胞凋亡情况，以Westernblot方法检测L

2、eydig细胞中cleaved．PAR／'、Fas蛋白的表达。结果脊髓损伤组凋亡Leydig细胞比例(32．15％)显著高于假手术组(12．78％)(P

3、*,YangMin，MaYanmin．*DepartmentofUrology,TheFirstAffiliatedHospital,theMedicalSchoolofXi'anJiaotongUniversity,Xi'an07001~ChinaCorrespondingauthor：GongYongguang,Email：gongyg@medmail,com．Cn[Abstract]ObjectiveToexploreinfluenceofspinalcordinjuryonleydigcellapoptosisandexpressionof

4、PARPandFasgene．Methods20adulthealthySDratswererandomlydividedintosham-operationgroupandspinalcordinjury(SCI)group．Theanimalswerekilledon14daysafteroperation．Fluorescenceactivatedcellsorter(FACS)wasusedtoquantitativelyassessapoptosisofLeyaigceHs．Western-blotwasappliedtodetectcl

5、eaved—PARPandFasproteins．ResultsOnday14alteroperation，theincidenceofleydigcellapoptosisinSCIgroupwas32．15％，significantlyhigherthanthatofsham—operationgroup(12．78％)．Cleaved·PARPandFasproteinswerebothfounddramaticallyhigherinSCIgroupthansham-operationgroup．ConclusionSpinalcordin

6、jurytriggersapoptosisofLeydigcells，andPARPandFasgeneareinvolvedinregulationofthisprocess．[Keywords]Spinalcordinjuries；Apoptosis；Leydigcell；PARP；Fas临床研究发现脊髓损伤患者常发生低睾酮血材料与方法症，甚至睾酮缺乏症，对患者生理功能和康复造成严重影响【1弓】，但其发生机制尚不清楚。1．实验动物与分组：成年健康雄性SD大鼠20成年男性体内睾酮主要来源于睾丸组织中的只，体重(265±15)g，由西安交通大学医学

7、院动Leydig细胞，本研究通过建立脊髓损伤的大鼠模物中心提供。2O只大鼠随机分脊髓损伤组(，l=10)型，观察脊髓损伤后Leydig细胞凋亡与PARP、Fas与假手术组(=10)。基因的表达情况，探讨脊髓损伤后低睾酮血症的发2．主要材料：Percoll细胞分离液购自美国Pharmica公司，Beads购自美国sigma公司，流式生机制。凋亡试剂盒购自Roche公司，兔抗人Fas多克隆抗体及兔抗人PARP多克隆抗体均购自SantaCruz生物科技公司；IRnye680RD标记的山羊抗小鼠二抗DOI：10．3877／emaj．ism．1674-078

8、5．2014．17．014及IRDye800CW标记的山羊抗兔二抗均购自美国基金项目：国家自然科学基金资助项目(81270