卵黄免疫球蛋白的最新研究概况及应用前景.pdf

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1、·16·《上海畜牧兽医通讯》201年第。期卵黄免疫球蛋白的最新研究概况及应用前景索江华江青东(郑州牧业工程高等专科学校生物工程学系河南郑州450011)卵黄免疫球蛋白(Immunoglobulinofyolk．IgY)，叉称卵部分蛋白质是脂蛋白，存在于卵黄颗粒中，不溶于水，只有黄抗体，是鸡(或者说禽类)经特定抗原免疫后．可产生相应p、丫一卵黄球蛋白是水溶性的，IgY是7一卵黄球蛋白。因此的特异性抗体．并不断储存于卵黄中的抗体，它是卵黄中唯如何去除高浓度的脂类对于IgY的分离纯化是至关重要的。一的免疫球蛋白。作为动物疾病诊断与防治的生物制剂，具IgY分离纯化的原则是简

2、便、高效、经济。目前常用的有安全、高效、无毒副作用等优点，并在疾病诊断和防治等领分离方法主要有：有机物沉淀法、有剂溶剂沉淀法、水稀释法域得到了广泛的应用。(WD法)、超临界气体提取法(SFE法)、去污剂分离法等。1IgY的结构与性质为了将IgY从水溶液中分离出来，人们主要通过超滤法或沉1．1IgY的结构特点淀法来完成。IgY是蛋白质，而蛋白质的提纯主要采用层析正常鸡的IgY分子量约为180KD，由两条重链和两条技术，因此，人们在进行IgY的纯化时常用的方法是凝胶层轻链组成，分子量分别为67000和22000。等电点为6．5～析和离子交换层析。目前使用的提取、纯化方法

3、各有优缺7．5，含氮量为l4．8％。尽管IgY同免疫球蛋白E(IgE)和点：沉淀法简单、经济，但其提取的物质纯度低；亲和层析能IgM有相似的结构特征，但从抗体产生特性及数量来看，IgY得到高纯度的特异性卵黄抗体，但因产率低、费用高而不能与哺乳动物IgG更相似。但随着研究的深入，人们发现IgY得到大规模应用，仅适用于科研；WD法和SFE法具有工艺可能是哺乳动物IgG和IgE的祖先]。最近的研究表明，简便、生产成本较低、产品纯度和回收率高等优点，比较适合IgY的疏水基团多于IgG【2j。比较IgG和IgW的端序列发大规模工业化生产J。总的来说，在实际生产过程中，应优现，

4、IgG的CY2和CY3区与IgV的Cu3和Cu4区十分相似。化组合各种纯化方法，制备更加经济、高产率的层析柱。1．2IgY的化学特征3IgY在临床中的应用IgY具有良好的稳定性，耐热、耐酸、耐碱较好。Shimizu3．1家禽疾病诊断与治疗方面等研究IgY和哺乳类IgG(牛、山羊、兔)的热稳定性，结果表在病毒病诊断方面，黄莉等【9应用荧光抗体诊断技术，明IgY与哺乳类(除兔以外)IgG有着大致相同的热稳定性。将抗新城疫IgY、抗传染性支气管炎lgY、抗传染性法氏囊病Larsson等报道，IgY制剂于4"C贮存5年或室温下放置6个IgY用荧光素异硫氰酸盐标记后，用于诊断

5、ND、IB和IBD。月，抗体活性没有受到显著影响【3；溶解于生理盐水中在孙凌霜等【1叫制备了兔抗鸭IgY(H+L)辣根过氧化物酶标记4℃贮存6～7年，抗体活性降低不超过5％；具有耐高渗性抗体，为鸭抗体的检测提供了新的试剂。VanRegenmortel能【4和很好的耐反复冻融的特性。IgY对pH值和蛋白水解等【1”将鸡补体C1和豚鼠补体C1混合，进行定量微量补体酶有较好的稳定性。IgY在pH=4．10～儿．1O时比较稳定，结合试验，解决了禽类补体难以固定的问题。Shin等【】2】用pH值为3．10～3．15时活性迅速下降，pH为12．10时活性幽门螺杆菌的不同蛋白成分

6、免疫鸡，制备的IgY能鉴别5种也降低。Yolken等报道，IgY能够抵抗幼龄动物的胃酸屏幽门螺杆菌的免疫优势蛋白，为制备幽门螺杆菌特异性诊断障，抵抗肠道中胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶的消化。Shimizu试剂开辟了途径。等对IgY进行了脂质体包埋IgY的探索，发现在pH：2．18张岐蜀等应用IBD二价弱毒细胞苗和二价油乳剂灭活的胃蛋白酶液中37℃温育1h后，包埋的IgY仍可保留80％苗强化免疫鸡，待高免鸡血清AGP抗体效价达1：256以上的活性，而未包埋IgY的活性几乎全部丧失。研究还表明，时，收集高免蛋，制备抗IBD高免卵黄抗体，高免卵黄抗体IgY不能活化哺乳动物的补体

7、系统【5J，不与血清中存在的类AGP效价为1：64～1：128，应用高免卵黄抗体治疗IBD病鸡风湿因子(RF)起反应【6】，不与蛋白质A和G起反应，不影响万余羽，肌注剂量为1ml／羽，有效率达90％以上，试验表明，哺乳动物IgG发挥作用，且不与哺乳动物的Fc受体起反IBD高免卵黄抗体具有特异性好、治愈率高的特点。梁月丽应]。因此IgY可用于实验室的诊断和研究，如ELISA、免等开展了鸡脑脊髓炎高免卵黄抗体的制备及治疗试验，试验疫电泳、琼脂糖凝胶扩散试验及相应的临床试验等。证实了高免卵黄抗体的理想疗效。2IgY的制备3．2家畜疾病诊断和治疗方面2．1应用传统的蛋白