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1、·52·JournalofPostgraduatesofMedicine,June2000,Vol.23,No.6·检验与临床·抗生素杀菌滤液刺激全血产生肿瘤坏死因子、白介素6和白介素8的作用1123聂大平,李振国,于喜梅,张秀英(1.大连医科大学附属第二医院检验科,辽宁大连116023;2.大连大学检验系,辽宁大连116622;3.普兰店市妇儿医院检验科,辽宁普兰店116200)中图分类号:R73-362文献标识码:A文章编号:1002-0764(2000)06-0052-021材料与方法组作对照,37℃孵育6
2、h,菌液经0.22μm滤器过1.1材料头孢三嗪(CRO)为上海新药业有限公滤,除去细菌菌体成分。司产品,亚胺培南(IMIP)为默沙东公司产品,庆大1.2.3抗生素杀菌滤液刺激全血细胞释放细胞因霉素(GEN)为烟台第二制药厂产品,氧氟沙星子无菌采集正常健康人血20ml(肝素抗凝),分(OFX)为江西东亚药业有限责任公司产品。大肠埃别与各种抗生素杀菌滤液按9∶1混合,按1ml/孔加希菌(ATCC25922)。肉汤培养基购于江苏宜兴万入24孔组织培养板内,每种抗生素做3个平行孔,石培养基厂。组织培养板为丹麦NUNCIO
3、N产品,37℃、5%CO2振荡孵育8h后分离血浆。微孔滤器购于上海医药工业研究所。1.2.4细胞因子测定用ELISA法,试剂盒购于1.2方法上海森雄科技实业有限公司,操作按说明。1.2.1药物MIC测定用试管法测得四种药物对1.2.5统计学处理所有数据用q检验。大肠埃希菌MIC值,分别为CRO0.03mg/L,IMIP2结果0.25mg/L,GEN0.25mg/L,OFX0.015mg/L。根据抗生素浓度在20×MIC时,接近常规用药[2]1.2.2抗生素杀菌滤液制备挑取37℃血平板培时的血峰浓度,内毒素刺激全血
4、细胞产生TNFα,[3,4]养过夜的大肠埃希菌,用肉汤增菌液调整其浓度1.5IL-6在8h达到高峰,因此我们选择抗生素浓8×10/ml,分别加入各种抗生素,使细菌的终浓度为度为20×MIC,杀菌滤液刺激全血细胞8h,测定5610～10/ml,药物浓度为20×MIC,以未加抗生素TNFα、IL-6和IL-8。结果见图1、2、3:图1图2图3抗菌素杀菌滤液(20MIC孵育6h)刺激全血细胞8h产肿瘤坏死因子,白细胞介素6、白细胞介素8。＊P<0.05,与其它各组相比医师进修杂志2000年6月第23卷第6期·53·3讨
5、论状体,因而释放的FLPS与CRO相近。GEN可抑由于FLPS生物活性是通过LBP/CD14途径完制细菌蛋白质合成,导致细菌生长停滞,细菌失活,成的,故选择全血细胞培养来研究抗生素杀菌滤液但无细胞壁裂解,且GEN能与FLPS结合,故在细刺激其产生TNFα、IL-6、IL-8的作用。这较以往菌裂解时有中等量的FLPS释放。用体外培养人单个核细胞观察LPS刺激靶细胞产综上所述抗生素杀菌机理的差异导致它们在杀生细胞因子的作用,更为接近生理状态和临床实际,菌过程中诱发GNB释放FLPS不同,从而使机体产并避免分离过程中对
6、单个核细胞的的刺激作用,减生细胞因子不同,而过多的细菌因子能加重炎症反少LPS污染机会,简化实验操作。应和病情,这就提示我们在治疗重症GNB感染时即本实验结果表明不同种类抗生素刺激血细胞产要保证抗生素的杀菌作用,又要尽可能使用较少导生细胞因子的水平是不同的,这间接反映了它们诱致内毒素释放的抗生素。导GNB释放FLPS的能力也不相同。CRO、OFX参考文献:[1]李晋,彭毅志.抗生素治疗导致细菌释放内毒素的研究进展杀菌滤液刺激血细胞产生TNFα、IL-6、IL-8水平[J].国外医学·抗生素分册,1998,6:46
7、6.明显高于IMIP和对照组,GEN杀菌滤液只引起较[2]李为,王玉莲.肿瘤坏死因子—内毒素在烧伤合并严重细菌多IL-6释放,而TNFα和IL-8水平与IMIP组感染病人中作用的临床研究[J].中华流行病学杂志,1993,14和对照组无明显差异。这表明CRO、OFX诱导(增刊):40.GNB产生FLPS水平最高,IMIP最低,GNB介于两[3]李为,宋诗铎,官兰,等.内毒素和抗生杀菌滤液刺激全血者之间。与文献报道相似[4,5]。临床观察也表明用细胞产生肿瘤坏死因子的作用[J].中华医学感染杂志,1999,9(1)
8、:16～18.CRO治疗流感嗜血杆菌脑膜炎患儿后,脑脊液中[4]PRINSJM,KUIJPEREJ,MEVESSENMIC,etal.Releaseof[6]FLPS水平增加,病情加重。不同种类抗生素诱tumornecrosisfactoralphaandinterleukin6duringantibiotic导GNB释放FLPS能力的差异与药物作用机制有killingo
