高糖、高同型半胱氨酸致足细胞内质网应激时白藜芦醇对CHOP通路的影响.pdf

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1、·ll4·中华临床医师杂志f电子版12014年2月第8卷第3期ChinJClinicians(ElectronicEdition)．February1．2014．、r01．8．No．3基础论著高糖、高同型半胱氨酸致足细胞内质网应激时白藜芦醇对CHOP通路的影响李艳秦洁张姬欣马春明柳洁【摘要】目的观察体外高糖、高同型半胱氨酸(highhomocysteine，hHcy)以及高糖和hHcy共同环境下，小鼠肾小球足细胞内质网应激相关蛋白：葡萄糖调节蛋白78(glucoseregulatedprotein78，GRP78)、转录因子CHOP／GAD

2、D153(growtharrestandDNAdamage．induciblegene153)的表达，探讨高糖、hHcy及httcy和高糖共同诱导足细胞凋亡的内质网应激相关机制，观察抗氧化剂白藜芦醇(Resveratrol，RES)对足细胞的保护作用。方法分化后的条件永生化小鼠足细胞分组：正常对照组、高渗组(glucose5retool／L+甘露醇15mmol／L)、高糖组(glucose20mmol／L)、hHcy组(hHcy200tmaol／I)、hHcv+高糖组(hHcy200pmol／L+glucose20mmol／L)、混合+RE

3、S组(RES20Bmol／L预干预半小时+hHcy200~tmol／L+glucose20mmol／L)，作用24h。流式细胞术AnnexinVFITC／PI测定各组细胞凋亡率。rea1．timePCR、Westernblot分析各组细胞GRP78、CHOP的表达。结果商糖组与hHcy组的凋亡率、GRP78、CHOP的mRNA及蛋白表达均高于正常组(尸

4、高糖、hHcy体外能诱导足细胞凋亡，hHcy和高糖共同环境下对足细胞损伤及致凋亡作用更明显，提示两者肯协同作用，内质网应激参与其凋亡机制之中，抗氧化剂白藜芦醇能抵抗高糖和hHcy诱导的足细胞凋亡，阻断内质网应激CttOP通路为其机制之一。【关键词】高胱氨酸；细胞凋亡；内质网应激EfectofresveratrolontheCHOPpathwayofendoplasmicreticulumstressinducedbyhighglucose，highhomoeysteineinmurinepodocytesLiy。QinJie,ZhangJi

5、xin,MaChunming,Liu．1ie．GraduateDepartmentofShanxiMedicalUniversity，Ta&uan030001，ChinaCorrespondingauthor．’Liu库．Email：759551946@qq．corn[Abstract]0bjectiveToobservethemechanismoftheERS—inducedapoptosisinmurinepodocytes，whichinducedbyhighglucoseandhighhomocysteine，andtheexpre

6、ssionofendoplasmicrcticulumstTess(ERS)relatedprotein【GlucoseRegulatedProtein78(GRP78)，GrowtharrestandDNAdamageprotein153(GADD153)]．Weprobedtheprotectiveeffectofresveratrol(RES)onpodocytes．MethodsDifferentiatedconditionsimmortalizedmousepodocytesweredividedintosixgroups：the

7、normalgroup，themannitolgroup(glucose5mmol／L+mannitol15retool／L)，thehighglucosegroup(glucose20mmol／【，thehHcygroup(hHey200~tmol／L)，thehHcy+highglucosegroup(hHcy200gmol／L+glucose20mmol／L)，thehHcy+highglucose+RESgroup(RES20grnol／Lpreinterventioninhalfanhorn'+hHcy200pxnol／L+glu

8、cose20mmol／L)．Theindicatorsweremeasuredafter24hours．TheapoptosiswasdetectedbyAnnexin—V—FI