肝再生增强因子通过增加调节T细胞数量保护小鼠急性肝损伤.pdf

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1、细胞与分子免疫学杂志(ChinJCellMolImmuno1)2015，31(1·论著·文章编号：1007—8738(2015)01—0001—05肝再生增强因子通过增加调节T细胞数量保护小鼠急性肝损伤孙海青，娄金丽，刘新，时红波，任锋，段钟平(首都医科大学附属北京佑安医院临检中心，北京市肝病研究所，首都医科大学附属北京佑安医院人工肝中心，北京100069)[摘要]目的研究肝再生增强因子(ALR)保护急性肝损伤的作用及机制。方法将30只BALB／c小鼠随机分为正常对照组、急性肝损伤组和ALR干预组。急性肝损伤组小鼠按2mL／kg

2、体质量的剂量予以腹腔注射500mL／L四氯化碳(CCI)矿物油溶液t次。ALR干预组于CC1注射前8h尾静脉注射ALR质粒，正常对照组注射等量生理盐水注射液。收集小鼠肝组织和血液标本，HE染色观察肝组织病理形态学变化；生化法检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平；流式细胞术检测肝组织中调节性T细胞(Treg)的数量，实时定量PCR(qRT—PCR)检测肝组织Foxp3、ALR、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子仅(TNF．ot)的mRNA水平。结果ALR干预组小鼠肝组织中ALRmRNA表达水平显

3、著高于急性肝损伤组和正常对照组，急性肝损伤组与正常对照组相比无明显差异；流式细胞术检测结果显示ALR干预组小鼠肝组织中CD25Foxp3Treg／CD4T细胞为(5．90±0．10)％，高于急性肝损伤组的(4．234-0．46)％和正常对照组的(2．934-0．74)％，急性肝损伤组显著高于正常对照组；ALR干预组小鼠肝组织中Foxp3mRNA表达水平高于急性肝损伤组和正常对照组，急性肝损伤组高于正常对照组，但差异无统计学意义；ALR干预组与急性肝损伤组相比，IL-6mRNA、TNF—otmRNA表达水平降低，而与正常对照组相比

4、无明显变化，急性肝损伤组与正常对照组相比，IL-6mRNA、TNF．o【mRNA表达水平明显升高。结论ALR通过上调Treg数量保护小鼠急性肝损伤，可能与Treg下调肝脏IL-6、TNF一0【表达有关。[关键词]肝再生增强因子(ALR)；急性肝损伤；调节性T细胞[中图分类号]R322．47，R392．12[文献标志码]ATheprotectiveefectofaugmenterofliverregenerationonmicewithacuteliverinjurybyup-regulatingtheexpressionleve

5、lsofregulatoryTcellsSUNHaiqing，LOUJinli，LIUXin，SHIHongbo，RENFeng，DUANZhongping。ClinicalLaboratoryCenter，BeijingInstituteofHepatopathy，。ArtificialLiverCenter，BeijingYouanHospital，CapitalMedicalUniversity，Beijing100069，ChinalAbstractlobjectiveTostudytheprotectiveefecta

6、ndmechanismofaugmenterofIiverregeneration(ALR)onmicewithacuteIiverinjury．MethodsThi哪BALB／cmicewererandomlydividedintonormalcentreIgroup，acuteliverinjurygroupandALRinterventiongroup．Acuteliverinjurygroupwasgivenintraperitonealinjectionofthemixture(2mL／kgbodymassonce)o

7、fCCI(500mL／L)andmineraloil．ALRinterventiongroupwasgivenALRplasmidbytailintravenousinjection8houmbeforeCCIinjection．Thecontrolgroupwasinjectedthesameamountofnormalsaline．ThepathologicalchangesoflivertissueweredetectedbyHEstaining．Theserumwascollectedfordetectingalanin

8、etransaminase(ALT)andaspa~atetransaminase(AST)．ThefrequencyofregulatoryTcells(Tregs)inlivertissuewasanalyzedbyflowcytometry．ThemRNA