胰岛素和肾上腺素对血糖的调节.doc

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1、胰岛素和肾上腺素对血糖的调节（葡萄糖氧化酶法）实验目的：1.了解血糖浓度测定的原理和方法。2.了解并验证胰岛素和肾上腺素对血糖的调节。3.在实验中培养严谨的作风和准确进行实际操作的能力，提高分析问题的能力。实验原理：胰岛素和肾上腺素是体内对血糖调节的激素，胰岛素是唯一降低血糖的激素。通过对实验动物分别注射不同的激素，了解激素对血糖的调节影响。测定血糖的原理：在PH7.0条件下,葡萄糖氧化酶可催化葡萄糖生成葡萄糖酸和H2O2，后者在H2O2酶的作用下与苯酚、4-氨基安替吡啉生成红色醌类物质，在505nm处有最大吸收峰,吸光度与葡萄糖含量成正比。实验器材：[器材]：10mm

2、×100mm试管、试管架、恒温水浴、沸水浴、冰浴、蜡笔、721-分光光度计、兔台、注射器、手术刀片。[试剂]1.酶酚混合试剂主要成分：①　葡萄糖氧化酶②　H2O2酶　③　苯酚④　4-氨基安替吡啉2.葡萄糖标准储存液（100mmol/L）3.葡萄糖标准应用液（5mmol/L）取葡萄糖标准储备液5ml，置于100ml容量瓶中，加苯甲酸溶液至刻度。4.胰岛素注射液5.肾上腺素注射液实验内容与方法：一、注射药物并取血：1.分别取2只兔子，称量体重，从耳缘静脉采血2ML。2.2只兔子按体重分别注射肾上腺素和胰岛素，从注射药物时开始计时，每隔30分钟取血一次，一共取血4次，每次2M

3、L。二、血糖的测定1．取16×150mm试管3支按下表进行操作：试剂（ml）测定管标准管空白管血清或血浆0.1——葡萄糖标准应用液—0.1—蒸馏水——0.1酶酚混合试剂3.03.03.02．将上述各管混匀放入37℃水浴中加热15分钟，用波长505nm分光光度计进行比色，空白管调零点读取测定管与标准管吸光度。测定管吸光度标准管吸光度3．计算血糖（mmol/L）=　　　×标准管浓度4．计算注射药物前后血糖变化情况。实验注意事项：血清加量要准，否则会影响到结果的准确性。实验报告：思考题：1．实验结果如何，分析结果。2．讨论血糖升高和降低的临床意义及其维持恒定的因素？