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时间:2020-04-29
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1、油菜菌核病抗药性研究进展 摘要:从监测方法、监测标准、监测现状几个方面,对油菜茵核病抗药性监测研究现状进行了综述。 关键词:油菜茵核病;抗药性;监测 中图分类号:S435.654文献标识码:A文章编号:0439-8114(2010)04-0975-03 油菜菌核病[SclerotiniaScferotiorum(Lib。)deBary]是油菜上的三大病害之一,会造成菜子减产和含油量降低,该病造成的直接经济损失可达正常产量的5%~10%,严重时达到50%。多年来防治油菜菌核病的化学药剂主要采用的是苯并咪唑类杀菌剂或不同作用机理的杀菌剂与之复配的药剂,但随着药剂的常年使用,油菜菌核
2、病菌产生了明显的抗药性,从而使药剂的防治效果下降,甚至防治失败。 1 抗药性监测的药剂 目前防治油菜菌核病的杀菌剂主要有多菌灵、菌核净、咪鲜胺、乙霉威、速克灵、治萎灵、甲基托布津、农抗2-16及这些药剂之间的混配制剂。近年来随着这些药剂的使用,有的药剂防治效果明显下降,甚至防治失败,主要原因是油菜菌核菌对这些药剂产生了不同程度的抗药性。 为了合理用药,减缓抗性的产生,首先需要了解不同地区的抗性发展情况。为此,必须对不同地区的油菜菌核病进行监测。目前对油菜菌核病抗性的监测用得最多的药剂是多菌灵,其次是菌核净、乙霉威等。 2 抗药性监测方法 目前常用的油菜菌核病抗药性
3、监测方法有生物测定法和聚合酶链式反应(PCR)法。 2.1 生物测定法 生物测定法可以测出EC50值,通过比较各菌株的EC50值,把菌株分成不同的抗性水平。也可以利用药剂对油菜菌核病菌的最低抑制浓度(MIC),测定病菌的耐药抗性。当把菌株置入这个浓度的含毒培养基上时,能够生长的为抗性,不能生长的为敏感。从而把不同抗性水平的菌株分开。 2.2 聚合酶链式反应(PCR)法 β-微管蛋白198位氨基酸由谷氨酸(Glu)突变为丙氨酸(Ala)是导致核盘菌产生对多菌灵田间抗药性的主要原因。根据这一点突变,通过设计引物和探针来检测该位点是否突变,以期实现油菜菌核病菌对多菌灵抗药性的快速
4、实时定量检测。 3 抗药性监测的标准 目前根据油菜菌核病菌对多菌灵等药剂的敏感性,大致将油菜菌核菌分为低抗、中抗、高抗3类。也有的划分更细,在低抗下面又分敏感类型,在高抗上又分极高抗类型。 抗药性的指标一般采用EC50值。抗药性的划分标准为:lmg/L5050>100mg/L的为高抗。 在实际的大量监测中,为了方便起见,有很多人采用MIC作为鉴定的指标,一般把MIC=5mg/L作为区分抗性与敏感的标准。有的划分标准更详细一些,如杨敬辉等在进行油菜菌核病对多菌灵的抗性监测时,划分标准为:MIC500mg/L为极高抗。油菜菌核菌对乙霉威的敏感性划分标准为:MIC50mg/L为高
5、抗。 也有的在进行监测时,兼用EC50和MIC两个指标的标准。如李红霞等㈣在进行油菜菌核病对多菌灵的抗性监测时,把在含药PDA培养基上不能生长的确定为敏感菌株,1mg/L50≤10mg/L为低抗菌株,10mg/L100mzJL为高抗菌株。 4 抗药性监测现状 4.1 对多菌灵的抗药性监测 通过前人进行的抗药性监测比较分析,发现油菜菌核病菌对多菌灵产生的抗药性的范围在不断扩大,抗药性检出率有逐年提高的趋势。 潘以楼等于1995年在江苏省镇江农科所油菜试验田中发现了抗多菌灵的Ssclerotiorum菌株,并进一步监测了其对多菌灵的敏感性。从中发现有6个抗多菌灵的抗性菌株,而
6、且这6个菌株抗性水平都很高,EC50均大于2000mg/L.MIC无法测出,但抗性的检出率只有7%。而张夕林等于1996~1997年对江苏省通州市油菜菌核病菌株进行室内测定,以多菌灵MIC=5mg/L作为区分抗性与敏感的标准。发现1996年菌核病对多菌灵表现抗性的菌株达41.00%,而1997年产生抗性的区域范围进一步扩大,其抗性比例明显上升,检测的521株菌株中,抗性比例达到65.83%,比1996年上升了24.83个百分点,其中抗性比例在50%1;A上的乡镇占82.35%。1998~2001年抗性菌株的数量上升更快,其抗性比例高达80.45%、82.27%、84.65%、85.79%,
7、说明在通州市油菜菌核病产生了明显的抗药性。在多菌灵防治油菜菌核病的田间试验中,在菌核病菌普遍产生抗性的情况下,即使用药量加倍,防病效果仍较差。菌核病一旦对多菌灵产生抗性,就表现出很强的耐药力,且不受多菌灵用药剂量的影响。 近年来,对油菜菌核病菌抗性监测研究最多的地域为江苏,其次为安徽、湖北等。通过监测发现,油菜菌核病菌对多菌灵的抗性范围在不断扩大,抗性比例也在不断升高。不同省份之间的油菜菌核病的抗药性有明显差异,而且即
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