解脲脲原体和人型支原体分离鉴定、计数、药敏试剂盒使用说明书.doc

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1、解脲脲原体和人型支原体分离鉴定、计数、药敏试剂盒使用说明书(本产品只用于体外诊断)本试剂盒适用于解脲脲原体(Ureaplasmaurealyticum,Uu)和人型支原体(Mycoplasmahominis,Mh)的分离鉴定、半定量计数和药敏试验。试剂盒由选择性培养基和试剂条组成。培养基中含有蛋白胨、酵母抽提物、马血清、生长因子等营养物，并加有尿素、精氨酸底物及酚红指示剂；当有Uu和Mh生长时，尿素和精氨酸被分解，生成的碱性物质引起pH值上升，培养基由黄变红。培养基内加有混合抗生素，可抑制泌尿生殖道中G+、G-细菌和真菌生长。营养成分和抑菌剂均采用冷冻干燥的方法保存，提高了试剂的灵敏

2、度、特异性和稳定性。试剂条的24个孔分别用于质控对照以及Uu和Mh的分离鉴定、半定量计数和九种抗生素的药敏试验。【培养基配方】（克/每升蒸馏水）pH6.3±0.3(25℃)培养基呈橙黄色、澄清透明。蛋白胨9g酚红0.05g胰蛋白胨6g复合生长因子10ml酵母抽提物4g马血清100ml氯化钠5g混合抗生素10ml　尿素0.5g半胱氨酸盐酸盐0.1g精氨酸盐酸盐3g【试剂盒组成】A.稀释液10ml×7瓶B.冷冻干燥培养基20瓶C.无菌石蜡油10ml×2瓶D.24孔试剂条20条E.报告单Ⅰ20张F.报告单Ⅱ　　　　　　　20张G.说明书1份　　Ｈ.无菌吸头20个【标本的采集】支原体对细胞表

3、面有很强的亲和力，尽可能收集到更多的细胞。建议采用无菌涤纶拭子采集样本。男性：用无菌拭子取尿道分泌物，或取前列腺液，中段尿，不育者可取精液。（注：尿后2小时内不能采集样本。）女性：用无菌拭子，取子宫颈分泌物。其它：羊水、脑脊液，留取1ml；前列腺液、精液、腹腔液留取0.5ml；支气管分泌物、痰、鼻、咽、耳和关节液均用无菌拭子采样。【接种与培养】注意：取材后立即送检，室温保存不得超过2小时，2-8℃不超过5小时。1.取出所需数量的冷冻干燥培养基，滴加稀释液到培养瓶中，充分摇匀，培养基完全溶解后液面至标签2.9ml刻度线处。（建议24小时内使用）1.1将50µl培养基加入C-空白孔中。1

4、.2接种分泌物样本：将无菌拭子采集的样本插入培养基中，挤压旋转拭子数次，使拭子中样本渗入，弃拭子。1.3接种液体样本：尿液经每分钟2000转离心10分钟，取沉渣0.2ml；其他液体标本取0.2ml，用无菌滴管或定量加样器接种。2.充分混匀接种了样本的液体培养基，用加样器分别准确量取50ul接种到试剂条余下各孔中（除C-）。3.加好培养基后，往试剂条的每一孔中滴加一滴无菌石蜡油（约50ul），然后盖上盖子。4.将剩余培养基连同试剂条一起置35～37℃孵箱培养，分别于24和48小时观察结果。【结果判断】1.1C-孔（空白孔）阴性（-），试验有效，判断余下各孔结果。1.2C-孔（空白孔）阳

5、性（+），表示污染，试验无效。2.1C孔（对照孔）阳性（+），有Uu和（或）Mh生长，判断试剂条余下各孔结果。见结果判读表。2.2C孔（对照孔）阴性（-），报告解脲脲原体和人型支原体阴性。结果判读表试剂孔编号阳性阴性结果判断质控孔1．C-空白孔红黄阳性：试验无效阴性：判断余下各孔结果2.C对照孔阳性：判断余下各孔结果阴性：报告解脲和人型培养阴性分离鉴定与半定量计数3.Uu红黄阳性：解脲脲原体生长根据临床情况决定是否治疗○14.Uu≥104阳性：Uu≥104CCU。需进行临床干预治疗（结果必须在24小时判读）5.Mh阳性：人型支原体生长6.Mh≥104阳性：Mh≥104CCU（结果必须

6、在48小时判读）注○1:尿液、精液及其它正常无菌部位采集的样本，培养阳性，即使Uu≤104，阳性结果仍然具临床意义。药物敏感性试验7.DOX48.DOX89.MIN410.MIN811.JOS112.JOS413.CLA214.CLA815.ROX116.ROX417.AZI218.AZI819.OFL420.OFL821.LEV222.LEV823.SPA124.SPA4红黄LH敏感（S）：--中介（I）：+-耐药（R）：++【注意事项】1.请注意生产日期，试剂盒2-8℃可保存18个月，不同批号的试剂不能混用。2.培养基复溶后和接种试剂条前都必须充分摇匀。结果判断应以试剂条为准。3

7、.支原体生长应保持培养基透明清亮，遇杂菌污染引起混浊变红者不得报告支原体阳性（但部分含分泌物较多的样本接种到培养基中可能引起培养基澄清度降低，要注意区别）。另外，培养瓶变红，而试剂条分离孔无支原体生长，多为样本中支原体含量很低引起。支原体生长培养基变色一般从瓶底开始，观察结果时不能摇匀培养液。4.Uu的计数结果必须在24小时内判断，Mh的计数必须在48小时判断。5.因为大部分标本是不均一分泌物，可能导致试剂条微孔接种量不均一，药敏结果不合理（高浓度孔有支原