利用RIL群体对精米氨基酸含量的QTL定位.doc

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1、利用RIL群体对精米氨基酸含量的QTL定位　　摘要：通过一个重组自交系及已构建好的遗传图谱，研究稻米氨基酸含量的ＱＴＬ定位。结果表明，通过Ｗｉｎｑｔｌｃａｒｔ软件发现多个控制不同氨基酸合成的区段，其中位于第一染色体的ＲＭ２５９～ＲＭ５８０片段影响了多种氨基酸的含量。通过氨基酸含量相关ＱＴＬ定位的研究，为将来的分子标记辅助选择改良稻米营养品质打下了基础。　　关键词：水稻；重组自交系；氨基酸；赖氨酸；数量性状基因座；营养品质　　中图分类号：Ｓ７８６文献标识码：Ａ文章编号：0439－８11416－340

2、8-04　　　　ＩｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆＱＴＬｆｏｒＡｍｉｎｏＡｃｉｄＣｏｎｔｅｎｔｉｎＭｉｌｌｅｄＲｉｃｅｂｙＲＩＬ　　　　ＺＨＯＵＸｕ－ｓｈｅｎｇ，ＨＥＹｕ－ｑｉｎｇ　　　　　　Ａｂｓｔｒａｃｔ：TheｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｔｒａｉｔｌｏｃｉanalysisforａｍｉｎｏａｃｉｄcontentinＯｒｙｚａｓａｔｉｖａＬ．wascarriedoutaccordingtotheｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｉｎｂｒｅｄｌｉｎｅanditsgeneticmap.Theresultsshowed

3、thatseveralsectionsforcontrolingdifferentａｍｉｎｏａｃｉｄs’sythesiswerefoundbysoftwareofWinqtlcart.TheＱＴＬｉｎｔｈｅｉｎｔｅｒｖａｌｏｆＲＭ２５９～ＲＭ５８０ｏｎｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ１ｉｎｆｌｕｅｎｃｅｄsomecontentsofａｍｉｎｏａｃｉｄs．Asaresult，rｅｓｅａｒｃｈｉｎｇonＱＴＬｏｆａｍｉｎｏａｃｉｄｃｏｎｔｅｎｔprovidedａｐａｔｈｗａｙｔｏｉｍｐｒｏｖｅｎｕｔｒｉｔｉｏｎｔ

4、ｒａｉｔｏｆｒｉｃｅｂｙmarker-assistedselection．　　Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ＯｒｙｚａｓａｔｉｖａＬ．；ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｉｎｂｒｅｄｌｉｎｅ；ａｍｉｎｏａｃｉｄ；lｙｓ；ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｔｒａｉｔｌｏｃｉ；ｎｕｔｒｉｔｉｏｎｔｒａｉｔ　　　　水稻是我国主要粮食作物之一，随着人民生活水平的提高，人们对稻米的营养功能越来越重视。人体主要通过食物摄取所需的氨基酸，尤其Ｌｙｓ在谷物中含量较低，且在加工过程中易被破坏而缺乏，因此被称为第一限制性氨基酸，也是衡量稻米营养品质的

5、重要指标［１，２］。但是由于营养性状的复杂性，容易受到环境的影响以及测定方法的复杂性，对于稻米氨基酸含量的改良一直比较困难。随着分子标记及遗传图谱的研究深入［３，４］，复杂性状的遗传研究成为可能［５，６］。同时由于ＱＴＬ定位的准确性很高，因此一些科学家建议将初步定位的ＱＴＬ直接用于育种，大幅降低育种成本［７，８］。利用中国香稻以及川香２９Ｂ为亲本构建重组自交系群体，研究控制精米氨基酸含量的ＱＴＬ，为稻米氨基酸含量的遗传研究打下基础，也为将来的分子标记辅助选择改良稻米营养品质提供理论依据。　　１材料

6、与方法　　１．１试验材料及田间管理　　研究所利用的群体是由水稻亲本材料川香２９Ｂ和中国香稻杂交后利用单粒传培育的２３５个Ｆ９、Ｆ１０重组自交系。亲本之一川香２９Ｂ是由四川省农业科学院培育而成的优良保持系，其不育系川香２９Ａ具有香味，开花习性好和异交结实率高等特点。中国香稻是中国水稻研究所培育而成的香稻优质晚籼品种。　　水稻亲本材料川香２９Ｂ和中国香稻及其杂交后利用单粒传培育的２３５个Ｆ９、Ｆ１０重组自交系分别于２００８年、２００９年种植于华中农业大学试验农场，每个株系种植１行，每行１０株，株行距为

7、１６．５ｃｍ×２６．４ｃｍ。　　１．２性状的考察　　１．２．１米粉的制备稻米经自然干燥后室温保存３个月，于４℃冰箱中保存。取２５ｇ左右的稻谷脱壳，碾出精米，再打成精米粉，将米粉过１００目筛，装入封口塑料袋中，置于－２０℃冰箱中保存。　　１．２．２精米氨基酸的测定样品须保证均匀，过６０～８０目筛。根据样品粗蛋白质含量，确定大体称样量，称取５０～１００ｍｇ左右样品于水解管中，加入６～８ｍＬ的６ｍｏｌ／Ｌ盐酸。液氮冷却，充入氮气，封口。１１０℃烘箱处理２２ｈ。消化后的样品过滤后，去离子水定容至５０ｍＬ。

8、取２００μＬ样品，真空干燥后加入２００μＬ０．０２ｍｏｌ／Ｌ的盐酸，振荡均匀。离心后吸１５０μＬ上清液于内插管内，以氨基酸测定仪检测。　　１．３连锁图谱和ＱＴＬ的定位　　利用Ｍａｐｍａｋｅｒ／ＥＸＰ３．０软件构建了一张包含１４４个ＳＳＲ标记的分子标记遗传连锁图谱［９－１２］。以构建好的分子标记遗传连锁图谱为基础，利用ＷｉｎＱＴＬＣａｒｔ软件对１７种氨基酸性状进行ＱＴＬ定位。采用ＬＯＤ值２．０作为阈值来判断ＱＴＬ存在与否，若标记区间ＬＯＤ≥２．０则认为该区间存在１个控制该性状的ＱＴＬ