沉降式宫颈液基细胞学制片技术常见问题分析.pdf

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1、临床与实验病理学杂志．，ClinExpPathol2014Nov；30(11)·1305·网络出版时间：2014—11—1914：31网络出版地址：http：／／www．cnki．net／kcms／doi／10．13315／j．cnki．cjcep．2014．11．030．html沉降式宫颈液基细胞学制片技术常见问题迈新==分析技术交琉郑汉城，施全，李丽萍，曹毅，夏健清，曾荣新关键词：液基细胞学技术；沉降式；原理片或部分空白(南方天气潮湿需要特别注意)，如玻片烘烤中图分类号：R．331文献标志码：B时间过长或玻片干燥不完全等。(3)处理过的载玻片应在文章编号：1001—73

2、99(2014)11—1305—02有效期内使用。(4)标本本身细胞量过少，可增加样品转移doi：10．13315／j．cnki．cjcep．2014．11．030量，必要时重新取样。(5)细胞沉降黏附的时间不够，规范操作。液基细胞学检查与传统的宫颈涂片检查相比明显提高3．2胞质染色效果不一致问题(俗称“阴阳片”)(1)设备了标本的满意度及宫颈异常细胞检出率，稳定的制片质量是滴液现象。(2)吸头(简称F头)位置不正确，染色机利用F保证检查率的重要因素。液基细胞学技术目前常见方法有头吸出多余的试剂或废液等，根据物理学的“虹吸现象”，其模式和沉降式制片技术等，在宫颈沉降式液基细

3、胞学制片技正确位置应尽可能的靠近染色仓壁，才能保证吸出充分。术中，常存在一些普遍的制片质量或者染色质量问题，此文(3)染色冲洗过程不充分。(4)无水乙醇／异丙醇混合的冲针对国产沉降式宫颈液基细胞学制片质量不稳定现状，通过洗液浓度变化，导致脱水不充分，影响染色，如使用时间过长总结和分析多家医院的沉降式液基细胞学制片质量、设备故或含有水份过多等。(5)定期更换二甲苯以及无水乙醇等障等常见问题，提出解决办法。试剂。3．3细胞核过于深染或过浅问题(1)适当缩短或延长苏1材料与方法木精染色时间。(2)适当降低或增加缓冲液的pH值。1．1材料收集广州市妇女儿童医疗中心2012年全年3．

4、4细胞质染色问题在出现染色问题时应当分析其具体20000余例宫颈液基细胞学标本，冲洗液(异丙醇：无水乙情况，首先应调整好染色时间，避免因染色时间过长或过短醇为1：1)，缓冲液(Tris)，使用安必平公司沉降式液基细胞而引起的染色问题，然后再进行试剂等方面的原因进行排学染色机、样品转移机等。查。(1)胞质过淡或上色效果差，此问题主要有三方面原1．2方法对标本排序和编号，震荡，抽取8ml转移至装因：EA／OG染色时间过短、缓冲液pH值过大(可根据苏木精有4m1分离提取液的离心管中，离心2次，第1次离心的染色效果进行判断)、脱水不充分、乙醇浸泡时间过长等。(20og，2min)，

5、吸去8ml上清液，第2次离心(800g，10(2)制片效果非正常的偏绿或完全呈绿色，主要原因有：冲min)，弃上清液，震荡。转移适量样品至染色仓中，沉降约洗液和脱水液浓度改变，EA／OG要求在无水的环境中充分10rain，染色，二甲苯透明5min，湿封片。着色，若冲洗液中含有水，易导致其脱水不彻底，染料上色能力降低。二甲苯使用时间过长或有水，可以通过外观和镜下2结果观察进行判断，严重者镜下可见水珠。(3)保证胞质的染色效果，主要在于试剂纯度的控制、缓冲液pH值的控制和染制片质量较好，染色鲜艳，不同类型细胞显色分明，细胞色时间的控制等。Tris缓冲液调节染色环境pH值，染色环

6、分布均匀，核质对比清晰，细胞核、核仁、核膜结构清晰，诊断境过酸或过碱，都可能会造成染色问题，应常规检测缓冲液信息明确。的pH值，参考范围为7．4～8．0【2J。过酸即pH值过低：胞质3讨论上色能力增强，碱性染料苏木精染色能力降低，常见胞质染色深，核染色过浅。pH值过高：易导致碱性染料苏木精上色3．1细胞量少问题(1)样品血液、黏液杂质过多、未取到能力增强，酸性染料EA／OG染色能力下降，常见核深染，胞足够的细胞等情况，必要时应重新取材。(2)细胞的密度及质染色淡。均匀度将取决于单位体积内有效细胞的数量、载玻片的清洁3．5血液、黏液过多的标本制片效果不佳问题(1)手工度与黏附

7、剂形成的共价键等、黏附剂的质量和玻片处理等问转移样品时，应把握好转移力度，保证分层效果。(2)第一题是主要因素，实验室通风设施不全，且湿度大，出现空白次离心后没有把上层8ml的上清液完全吸干净，样品在细胞分离提取液作用下，产生上下分层，其中中间的分层带是收稿日期：2014—09—02杂质最多的地方，需要充分去除。(3)适当延长标本振荡时作者单位：广州市妇女儿童医疗中心病理科520000间。(4)特殊处理：先离心(600g，10min)后将上清液转移作者简介：郑汉城，男，技士。E—mail：527410002@qq．