实验1-小液流法测定水势.doc

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1、实验一小液流法测定植物组织水势一、实验目的了解植物体内不同组织和细胞之间、植物与环境之间水分的移动与植物组织水势的关系；掌握小液流法测定植物组织水势的基本方法。二、实验原理植物组织的水势是表示植物水分状况的重要指标，植物各组织之间、各组织的细胞之间以及植物与土壤和大气环境之间的水分移动决定于它们的水势之差。当植物组织与外液接触时，如果植物组织的水势低于外液的水势，组织吸水、重量增大而使外液浓度变大；反之，则组织失水、重量降低而外液浓度变小；若两者相等，则水分交换保持动态平衡，组织重量及外液浓度保持不变。组织吸水或失水会使溶液的浓度、密度、电导率以及组织本身的体积与

2、重量发生变化。根据这些参数的变化情况可确定与植物组织水势相等的溶液。测定植物组织水势的方法有小液流法（根据外液密度的变化）、折射仪法（根据外液浓度的变化）和电导率仪法（根据外液电导率的变化），这些方法都属于液相平衡法。还可以通过气相平衡法（热电偶湿度计法、露点法和压力室法等）测定水势，主要是通过植物组织与周围气体的水势达到平衡，从而测定周围气体的水势。小液流法是目前比较快速、简单且准确性较好的一种方法。根据组织重量或外液浓度的变化情况即可确定与植物组织水势相同的溶液浓度，然后根据公式计算出溶液的水势，即为植物组织的水势。溶液水势的计算：Ψw=-icRT式中：Ψw—

3、—溶液的水势(MPa)；R——气体常数（0.00831Kg·MPa·mol-1·K-1；0.00831Kg·KJ·mol-1·K-1；0.0831Kg·bars·mol-1·K-1；0.Kg·atm·mol-1·K-1；0.0357Kg·cal·mol-1·K-1）；T——热力学温度(单位为K，K=273+t)；i——为解离系数（蔗糖为1）；c——等渗溶液的质量摩尔浓度（mol·Kg-1）。三、实验材料马铃薯块茎。四、设备与试剂大试管,小试管，青霉素小瓶或指形管，5ml移液管，弯头毛细吸管，培养皿，打孔器（直径1cm左右），剪刀，镊子，解剖针，甲烯蓝粉末或甲烯蓝浓

4、稠溶液。五、实验步骤1、配制蔗糖标准液根据植物水势的大小确定配制相应的系列标准液，放入试管中。M0.10.20.30.40.50.60.70.8母液12345678水987654322、编号取干燥洁净的大试管8支，编号。然后从相同编号的试管溶液中取4ml溶液，注入相同编号的空试管中，作为实验组。3、材料处理用打孔器打取小圆柱，用刀切1mm厚的圆片40片，放入实验组每管加5片，放置30min，中间摇动数次。4、染色向每管滴一滴次甲基蓝并摇动，使染色均匀。5、测定用毛细管从试验组吸取少许溶液，然后伸入对照组相同的试管编号的溶液中部，缓慢放出一滴，小心取出毛细管（勿搅动

5、有色液滴），观察有色液滴的升降情况。六、实验结果若有色液滴上升，表示浸过圆片的溶液浓度变小（即植物叶片组织中有水排出），说明马铃薯组织的水势大于该浓度溶液的水势；若有色液滴下降，则说明马铃薯组织的水势小于该浓度的水势；若有色小液滴静止不动，说明马铃薯组织的水势等于该浓度溶液的水势。若在前一浓度溶液中下降，而在后一浓度中上升，则植物组织的水势可取二种浓度溶液的水势的平均值。将实验结果记录在表2。分别测定不同浓度中有色液滴的升降，找出与组织水势相当的浓度。记录实验时的温度，根据原理公式计算出组织的水势。表2小液流法现象观察记载表蔗糖浓度（mol·kg-1）0.10.2

6、0.30.40.50.60.70.8有色液滴移动方向七、注意事项1.取材过程操作要迅速，以免失水。2.所有滴管尖端最好弯成直角，以保证从滴管出来的液滴不受向下重力的影响。八、问题讨论1、小液流法测定植物组织水势有何优缺点？2、用小液流法测定植物组织水势时，为什么应强调所用试管、毛吸管应保持干燥，打取小圆片并投入试管中时动作应迅速，加入甲烯蓝不能太多？