共微囊化大鼠肝细胞和骨髓间充质干细胞体外功能评价-论文.pdf

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1、·998-中华实验外科杂志2014年5月第31卷第5期ChinJExpSurg，May2014，Vo1．31，No．5·实验研究·共微囊化大鼠肝细胞和骨髓间充质干细胞体外功能评价张悦陈学敏孙冬林刘胜勇【摘要】目的制备共微囊化肝细胞和骨髓问充质干细胞(BMSCs)，观察微囊内BMSCs对肝细胞生物学活性的支持。方法利用微囊发生器制备微囊进行体外培养，同时建立微囊化肝细胞、非微囊化的单纯肝细胞培养组、肝细胞与BMSCs共培养组，通过观察囊内肝细胞形态和测定培养液上清中白蛋白和尿素的浓度评价肝细胞活性

2、和功能。结果肝细胞与BMSCs共微囊化组肝细胞分泌白蛋白水平、尿素合成能力自第1天起均显著高于单纯肝细胞微囊化组(P<0．05)，并在第2天达到高峰，而且下降趋势缓慢，在第7天仍有表达。结论肝细胞和BMSCs共微囊化能明显改善囊内肝细胞的功能和生存时间。【关键词】共微囊化；肝细胞；骨髓问充质干细胞；形态；功能ThepreparationandinvitrofunctionalevaluationofCO-microencapsulatedrathepatocyteswithbonemarrowm

3、esenchymalstemcellsZhangYue，ChenXuemin，SunDonglin，LiuShengyong．De—partmentofHepatobiliarySurgery，theThirdAffiliatedHospitalofSoochowUniversity，Changzhou213003，ChinaCorrespondingauthor：ChenXuemin，Email：tomuer@126．corn【Abstract】0biectiveToachieveCO—mic

4、roencapsulatedrathepatocyteswithbonemarrowmesen—chymalstemcells(BMSCs)，andstudythemaintenanceofrathepatocyteviabilityandfunctionswithinco—microencapsules．MethodsTherathepatocyteswereCO—micr0encapsulatedwithBMSCsatratioof2：1viaencapsulatorfor7daysinvi

5、tro．MicroencapsulatedhepatocytesaloneorcocuhivationwithBMSCswithoutmicr0encapsula【ingweresetupascontro1．ThefunctionsandviabilityofCO—micr0encapsulatedhepatocyteswereevaluatedbysecretionofalbuminandurea，aswellashepatocytemorphology，respectively．Result

6、sHepatocyteperformancelevelssuchasalbuminsecretionandureasynthesiswereallsignificantlyenhancedinCO—microencapsulationcomparedwithmicroencapsulatedhepatocytesalone(P<0．05)．Thebesthepat—icfunctionlevelswereachievedonday2andmoderatelydecreasedinthefollo

7、wingdays．Itwasstillde—tectableattheendpointofourexperiment(day7)．ConclusionCo—microencapsulationofrathepatocytesandBMSCscouldmaintainhepaticfunctions．morphologyandsurvivalnvitro．【Keywords】Co—microencapsulation；Hepatocytes；Bonemarrowmesenchymalsteince

8、lls；Morphology；Function我们采用肝细胞和骨髓间充质干细胞(BMSCs)胞周期检测试剂盒购自BD公司，小鼠抗细胞细胞色共微囊化培养后，观察BMSCs对肝细胞功能的支持作素P4503A1(CYP3A1)一抗购自英国Abcam公司，山用，为后续进行共微囊化细胞移植治疗肝功能衰竭的羊抗小鼠的二抗购自美国JacksonImmunoresearch研究奠定实验基础。Laboratories，白蛋白酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒购自BethylLaboratories公司，尿素检测